阿维拉霉素生产菌推理选育及其发酵条件的初步研究

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阿维拉霉素生产菌推理选育及其发酵条件的初步研究

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毕业论文范文题目：阿维拉霉素生产菌推理选育及其发酵条件的初步研究，论文范文关键词：阿维拉霉素生产菌推理选育及其发酵条件的初步研究
阿维拉霉素生产菌推理选育及其发酵条件的初步研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：阿维拉霉素是一种混合型的低聚糖，作为饲料添加剂应用的抗生素。它通过维持动物肠道内细菌的正常平衡，减少动物正常营养的消耗，从而达到促生长目的。本论文对一株绿色产色链霉菌发酵生产阿维拉霉素进行了初步研究，主要包括菌种鉴定，高产菌株的多重诱变及推理选育，阿维拉霉素发酵培养基及条件优化，以及扩大培养等内容。采用细菌形态学、电镜透射与扫描图象分析，菌株A-05的菌丝较为粗壮，不产生横隔膜，孢子短，卵圆形，表面为长刺所覆盖，孢子丝单分枝，有许多松敞或紧密的左旋螺旋；菌株细胞壁组分含有L，L—二氨基庚二酸，无特征性糖(胞壁I型，糖型C)，属于链霉菌属；生理生化特征与与绿色产色链（此处忽略..）霉菌相似；16SrDNA分析表明此菌株与绿色产色链霉菌同源性100％，因此初步判定菌株A-05为链霉菌属，绿色产色链霉种。该菌株与绿色产色链霉菌在利用棉子糖和纤维素方面存在差异，因此判定该菌株为一株绿色产色链霉菌的变种，并暂命名StreptomycesvirichromodenesVar．LH。通过对菌种A-05的代谢产物阿维拉霉素进行定性和定量分析，建立了阿维拉霉素萃取的工艺条件、检测发酵液中阿维拉霉素含量的微生物效价测定法和高效液相色谱法。采用二剂量法回归得到效价计算公式：Log~Y=0.6592R~2+0.5717。高效液相色谱法和质谱法分析验证了发酵产物为阿维拉霉素，其中以阿维拉霉素A为（本文此处忽略..）主要成分，分子量为1401，保留时间为35.46min。菌株经3000Gy的Co~(60)射线诱变、80U／mL阿维拉霉素抗性平板中抗性突变株的筛选、100U／mL链霉素抗性平板中抗性突变株的筛选、0.15％2-脱氧-D-葡萄糖抗性平板中抗性突变株筛选、0.35％α-氨基丁酸抗性平板中抗性突变株的筛选，得到一株阿维拉霉素高产菌株H-15，产量从原来的9.8U／mL提高到68.7U／mL，提高了近580％。通过对碳源、氮源的单因素考察确定了较优碳源为可溶性淀粉，木糖次之，而乳糖产量相对较低；较优氮源为豆粕粉，大豆蛋白胨次之，无机氮硝酸钾则较低。并利用响应面法对发酵培养基的组成进行了优化，得到较适培养基为可溶性淀粉20.12g／L，D-木糖为（此处忽略..）7.81g／L，豆粕粉为25.23g／L，大豆蛋白胨为5.06g／L，MnCl_20.60g／L，MgSO_4．7H_2O0.60g／L，pH7.2～7.4。培养基优化后阿维拉霉素效价比文献报道的初始培养基提高了65％。对摇瓶条件进行了单因素优化试验。斜面菌种保藏时间对种子活力影响不大，低温保藏具有较好的稳定性，保藏1周的斜面生物效价达到最高，斜面相对效价为104％，当保藏三周后，斜面生物效价只有72％；一级摇瓶种龄24h，接种量5％，装液量100mL／500mL三角瓶，pH7.2～7.4，发酵时间48h，阿维拉霉素有较高效价；发酵过程中在38h和46h两次补加1％葡萄糖时，产量比不补料提高了16％左右；乙酸钠在16h补加0.1％时，产量比不补料提高了29％；20h补加0.5％的豆（此处忽略..）油，产量比不补料提高125％。在5L玻璃罐试验结果表明，菌株发酵需氧量不高，通过转速和溶氧的联合控制，在发酵液中氧分压(pO_2)20％溶氧浓度下菌株阿维拉霉素产量达到160U／mL。放大到50L不锈钢罐，阿维拉霉素产量为164U／mL，豆油和葡萄糖补料，效价分别比分批发酵提高了18％和8％。

以上为本篇毕业论文范文阿维拉霉素生产菌推理选育及其发酵条件的初步研究的介绍部分。

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