白藜芦醇对肝癌自杀基因医治旁杀伤增效作用的GJIC机制

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白藜芦醇对肝癌自杀基因医治旁杀伤增效作用的GJIC机制

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毕业论文范文题目：白藜芦醇对肝癌自杀基因医治旁杀伤增效作用的GJIC机制，论文范文关键词：白藜芦醇对肝癌自杀基因医治旁杀伤增效作用的GJIC机制
白藜芦醇对肝癌自杀基因医治旁杀伤增效作用的GJIC机制毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：近年来,跟着分子生物学技巧的发展跟利用,用免疫疗法、基因医治等新方法以及多种疗法结合成为肿瘤医治范畴的研究热点。其中,自杀基因疗法是研究较深刻、存在利用前景的肿瘤医治新办法,全世界已经有多套自杀基因医治体系正在进行甚至已经实现Ⅰ-Ⅲ期临床实验。现有研究发明,多少乎所有自杀基因体系都存在旁杀伤效应,加强旁杀伤效应能降落对高转染率的请求,减少载体及前体药物用量跟毒性,加强基因医治体系对肿瘤杀伤力。因此,加强旁杀伤效应已成为进步肿瘤基因医治疗效的重要策略。从目前的研究看,产生旁杀伤效应的重要机制有:缝隙连接细胞通信(GapJunctionalIntercelhlarCommunicatiOn,GJIC)介导,细胞凋亡介导跟免疫介导等机制。其中,GJIC是产生旁杀伤效应的最重要机制之一。前期研究发明中药活性成分白藜芦醇在对细胞无明显毒性的（略..）低浓度前提下,结合HSV-tk/GCV体系能明显地进步GCV对tk~+、tk~-混淆细胞的杀伤率,存在明显加强HSV-tk/GCV体系旁杀伤效应的作用,其增效作用存在协同性。其作用机制很可能是通过加强细胞的GJIC跟引诱凋亡、调节细胞周期等来起到增效作用的,也可能是两个机制都起作用。中药是一个天然药物宝库,在引诱癌细胞凋亡、加强肿瘤GJIC或进步患瘤机体免疫功能等方面存在上风或潜力,且毒副作用绝对较少,从中寻找自杀基因增效药物并研究其作用机制,树破中西医结合疗法存在可行性跟良好的利用前景。研究目标:本课题抉择对自杀基因体系有协同增效作用,获得断定作用的中药活性成分白藜芦醇,探讨其通过GJIC加强自杀基因旁杀伤效应的药理靶点,阐明其增效的机理,为树破肿瘤基因医治结合中医药疗法,推动肿瘤基因医治的临床利用跟抗癌中药新药开发打下基本（文章此处忽略..）。实验方法:本文以体外培养的人肝癌细胞HepG2跟大鼠肝癌细胞CBRH7919作为研究对象,首先采取MTT法作出白藜芦醇对肝癌细胞的成长曲线,打算IC50,断定药物浓度及作用时光。划痕标记染料示踪技巧(scrape-loadingdyetransferassay,SL/DT)、双荧光素传输流式细胞仪检测白藜芦醇对肝癌细胞GJIC功能的影响,Western-blot法检测白藜芦醇对缝隙连接蛋白Cx43跟Cx32表白的影响。成果:1中药活性成分白藜芦醇对HepG2细胞的影响药物作用前镜下察看各孔细胞跟状况未见明显差别,而药物作用24小时起镜下察看可见50μM组跟100μM组的细胞数量明显减少;跟着孵育时光的增加,25μM组也明显产生细胞成长克制景象。至60小时10μM组仍未见明显细胞成长克制景象,而浓度为25μM以上的各组贴壁细胞逐步变圆、脱落。用10μM、25μM、50μM、100μM、的白藜芦醇作用于H（文章此处忽略..）epG2细胞60h,MTT检测各组存活率分辨为90.8±4.0%(p=0.085＞0.05)、73.6±4.8%(p=0.005＜0.01)、40.5±3.9%(p=0.0007＜0.01)、26.7±3.2%(p=0.0004＜0.01);It50为43μM。可见白藜芦醇对HepG2细胞成长有必定的克制效应,且作用呈时光跟剂量依附关联。阐明白藜芦醇对HepG2有细胞毒作用。2.SL/DT法对肝癌细胞间染料传输功能进行检测,成果显示:细胞经过白藜芦醇处理后,细胞间染料传输功能获得加强;流式细胞仪检测白藜芦醇对双荧光素传输的影响,成果显示:白藜芦醇等处理组红绿荧光素双阳性染色(双阳性染色越多阐明GJ功能越好)的比例比对比组明显增加,而且有浓度依附性。表明白藜芦醇能进步HepG2细胞及CBRH7919细胞的GJIC功能。3.Westernblot检测,用国产多克隆Cx一抗跟进口单克隆Cx一抗的实验均显示:白藜芦醇等能明显进步人肝癌细胞HepG2跟大鼠肝癌细胞CBRH7919的Cx32的表白,且有时光、（略..）浓度依附性,氧化剂H_2O_2能克制白藜芦醇此作用;但白藜芦醇对HepG2及大鼠肝癌细胞CBRH7919的Cx43表白影响24h不明显,48h能明显进步Cx43表白。有浓度依附性。论断:本文在前期实验中药活性成分白藜芦醇对HSV-TK/GCV自杀基因疗法的增效作用,能有效进步自杀基因对肝癌细胞的克制率,进步傍观者效应,而且有协同增效作用的基本上对其机制进前进一步研究,成果表明,白藜芦醇能进步肝癌细胞Cx表白,加强GJIC功能,可能是其加强tk基因傍观者效应的机制之一。

以上为本篇毕业论文范文白藜芦醇对肝癌自杀基因医治旁杀伤增效作用的GJIC机制的介绍部分。

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