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罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织ⅠκB激酶β表白的作用

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毕业论文范文题目:罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织ⅠκB激酶β表白的作用,论文范文关键词:罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织ⅠκB激酶β表白的作用
罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织ⅠκB激酶β表白的作用毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标:非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholicsteatohepatitis,NASH)是一种获得性代谢疾病,多由单纯性脂肪肝发展而来,当炎症持续存在,可发展为肝纤维化甚至肝硬化,是隐源性肝硬化的重要起因之一。IKK激酶复合物(InhibitkappaBkinasecomplex,IKKs)属于丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)蛋白激酶超家族成员,重要由三个亚单位组成:两个催化亚基IκB激酶β(inhibitkappaBkinasebeta,IKKβ)跟IκB激酶α(inhibitkappaBkinasealpha,IKKα),一个调节亚基IκB激酶γ(inhibitkappaBkinasegamma,IKKγ/NEMO)。其中IKKβ是核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)激活所必须的,它参加炎症相干基因及抗凋亡基因的表白。最新的研究表明,它在肝脏、结肠、肺脏、骨组织中有表白,与炎症反应、细胞凋亡、胰岛素抵抗、脂肪肝、急性肝伤害等病理过程跟疾病关联密切,但分子机制不清。曾民德报道胰岛素抵抗跟脂肪组织脂解增高长短酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfattyliverdisease,NAFLD)发病机制的核心环节。罗格列酮为噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂,其通过激活靶组织中的过氧化酶体增殖激活受体γ(peroxisomeproliferator(略..)s-activatedreceptorgamma,PPARγ),来进步靶组织的胰岛素敏感性,改良胰岛素抵抗。本文旨在探讨IKKβ在NASH病理变更机制中的作用及PPARγ配体罗格列酮的影响效应,为懂得NASH的发病机制跟医治提供根据。方法:选用雄性健康干净级Wistar大鼠38只,体重140±10g,畸形豢养一周后,随机分为畸形对比组10只跟高脂饮食组28只。畸形对比组给予标准饲料;高脂组在标准饲料的基本上参加10%猪油、2%胆固醇跟5%玉米油。于第16周股静脉放血处死畸形对比组大鼠2只跟高脂饮食组大鼠4只,察看肝脏的色彩、质地,留取肝组织标本,经HE染色证明NASH大鼠模型构成。畸形对比组余8只大鼠持续给予标准饲料豢养,高脂饮食组另24只随机分为模型对比组、高剂量医治组(罗格列酮4mg/kg·d)、低剂量医治组(罗格列酮1mg/kg·d),每组各8只,于28周末一并处死四组大鼠共32只,留取血清,以备血清学检查。取肝右叶组织3块,分辨用于疾速冰冻切片,行SudanⅣ染色,察看肝细胞脂变情况;10%的甲醛固定用于HE染色及Masson染色,察看肝组织的炎症、脂肪变性及纤维化程度;4%多聚甲醛固定用于IKKβ免疫组化染色,察看肝组织IKKβ的表白;余肝组织经液氮速冻后置于-80℃冰箱,用逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechaieaction,RT-PCR)察看大鼠肝组织IKKβmRNA的(略..)表白。用日本OlympusAU2700全主动生化分析仪检测血清胆固醇(cholesterol,TC),甘油三酯(triglyceride,TG),丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT),天冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase,AST);用ELISA双抗体夹心法测定血清肿瘤坏逝世因子α(tumornecrosisfactoralpha,TNF-α)表白量。HE染色察看肝组织个别病理变更;SudanⅣ染色察看肝细胞脂变的程度;Masson三重染色察看肝纤维化程度;采取PowerEnvision两步法对肝组织标本进行IKKβ免疫组化染色。用多功能图像分析仪测定IKKβ表白面积百分比,每张切片取四处及中心五个区域,20倍物镜下打算均匀面密度(阳性面积与统计局面积百分比),成果取均匀值。用SAS10.0统计软件处理所有数据,计量材料采取x±s表示,采取单因素方差分析前进行方差齐性测验,Student-Newman-Keuls法进行组间比较。相干性分析用直线相干分析法。成果:1大鼠的个别表示:畸形对比组大鼠皮毛有光泽、活泼,体重逐步增加,模型组较畸形对比组大鼠体重增加明显,医治组大鼠体重增加减慢。28周末,畸形大鼠肝脏外观呈红褐色,晶莹有光泽;模型组大鼠肝脏色彩呈浅黄或土黄色,切面油腻感,无光泽。医治组大鼠肝脏色彩呈淡黄色,较有光泽。(略..)2血清学指标的变更:与畸形对比组比拟,模型组大鼠血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、血清肿瘤坏逝世因子α(TNF-α)程度明显增高(P0.01);与模型组比拟,医治组血清生化指标及TNF-α程度明显降落(P0.01)。3肝组织病理学变更及免疫组织化学:光镜下,畸形对比组大鼠肝细胞以中心静脉为核心呈喷射状排列,SudanⅣ染色肝细胞胞浆呈天蓝色,Masson三重染色示中心静脉及汇管区未见明显胶原纤维。模型对比组大鼠肝细胞均呈现中、重度的脂肪变性,伴有小叶内炎症及汇管区炎症,还有点状或灶状坏逝世,部分呈现窦周及中心静脉纤维化,SudanⅣ染色可见脂变的肝细胞胞浆中有密布散在的红色颗粒,肝细胞内有不同程度炎症。医治组浮现脂变及炎症程度明显减低,未见明显纤维化。畸形对比组大鼠肝组织免疫组化染色可见IKKβ在胞浆有弱表白,表白部位呈浅黄色,IKKβ绝对含量为6.78±8.87。与畸形对比组比拟,模型组大鼠肝组织表白IKKβ的肝细胞数明显增多,且重要表白在肝细胞核,阳性部位呈深棕黄色,IKKβ绝对含量为47.93±11.72。与模型对比组比拟,医治组大鼠肝组织IKKβ表白的绝对含量明显降落为33.68±6.74,以高剂量医治组的变更为著为20.65±5.91(P0.01)。4相干性分析:各组大鼠肝组织IKKβmRNA表白与血清TNF-α程度呈正相干(r值分辨为0.940、0.762、0.973、0.947,P值分辨为0.01、0.05、0.01、0.01),模型组(此处忽略..)与高剂量医治组IKKβmRNA表白与血清ALT、AST程度正相干(r值分辨为0.772、0.810、0.720、0.842,P值分辨为0.05、0.05、0.05、0.01)。论断:1利用高脂饮食的方法可能成功制备NASH大鼠模型,脂代谢混乱是NASH产生跟发展的重要机制。2模型组大鼠肝组织IKKβ表白、血清TNF-α程度明显高于畸形对比组,与血清ALT、AST程度呈正相干,而与肝纤维化程度无关。表明NASH发病机制中IKKβ促进TNF-α开释,导致IKKβ-TNF-α恶性轮回,促进胰岛素抵抗的产生发展。3医治组大鼠肝组织IKKβ表白、血清TNF-α程度较模型对比组明显降落,与血清ALT、AST程度呈正相干。提示罗格列酮可克制IKKβ的表白,减少TNF-α的产生跟开释,阻断IKKβ-TNF-α恶性轮回,改良胰岛素抵抗,阻断NASH的产生发展。这为临床上利用PPARγ冲动剂医治NASH提供了实际根据。


以上为本篇毕业论文范文罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织ⅠκB激酶β表白的作用的介绍部分。
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