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硫糖肽的制备及其抗胃溃疡的活性研究

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毕业论文范文题目：硫糖肽的制备及其抗胃溃疡的活性研究，论文范文关键词：硫糖肽的制备及其抗胃溃疡的活性研究
硫糖肽的制备及其抗胃溃疡的活性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：胃溃疡(gastriculcer,GU)指胃内受胃液、胃酸跟胃蛋白酶调节范畴的黏膜层、黏膜下层,甚至肌层跟浆膜在多种因素的影响下产生的局限性组织缺损性疾病。其重要特点是轻易复发,难于避免,因此进步溃疡愈合品质是治愈GU的关键因素。近年来研究表明溃疡愈合品质与修复受损黏膜密切相干,GU的愈合不仅请求黏膜名义的修复,下层的修复更为重要。通过对GU发病机制的研究发明抗炎跟胃肠粘膜保护已经成为GU医治的重要准则。黏多糖类物质作为构成生命的基本物质之一,参加很多重要的生理活动,其独特的生物活性已成为生物化学跟医学范畴的研究热点。目前发明的存在生物活性的糖类已有上百种,对其构造跟功能的研究越来越深刻,其中黏多糖类广泛的抗炎活性引起人们的器重,且其作用机制多样,同时发明经过润饰后的糖类衍生物,因为其构造的改变,生物活性也有明显的加强。鉴于此,本实验采取硫糖肽为研究对象,以猪十二指肠为原料提取糖肽,经磺化润饰制备硫糖肽；并进行处方优化,在此基本以猪十二指肠类肝素为原料开辟制备硫糖肽的新道路,制备硫糖肽类物质；用大鼠胃溃疡模型进行抗胃溃疡活性筛选,并对活性硫糖肽进行分别纯化,测定其分子量；为比较硫糖肽的药理活性与其糖链部分的关联,采取酶解法将硫糖肽（文章此处忽略..）中的糖链开释出；为研究硫糖肽的抗炎跟抗溃疡活性,本实验在体外检测了硫糖肽及其糖链对大鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α跟IL-4的作用,并在体内考察硫糖肽对实验性胃溃疡大鼠的医治作用。本研究获得的论断有以下多少个方面：1糖肽的提取制备及磺化工艺优化猪十二指肠经过脱脂、酶解跟离子交换纯化得到粗品糖肽,应用强阴离子交换树脂交换吸附杂质,精制糖肽,收率为0.96%～1.17%,比文献报道的0.5%～0.66%进步将近一倍。醋酸纤维素薄膜电泳鉴定产物较为污浊,利用苯酚-硫酸法测定其总糖含量为(22.47±1.41)%,BCA蛋白浓度测定试剂盒测定糖肽蛋白含量为(14.15±1.06)%。糖肽采取三种磺化方法进行化学润饰,产物表示为SG。通过三种方法的优劣比较,断定采取氯磺酸-甲酰胺法,进而设计反应温度、反应时光、氧化除氨pH三个因素考察在此前提下四个程度的工艺路线,设计正交实验进行处方优化,以产物硫酸基团跟总糖含量作为检测指标,筛选出磺化最佳工艺为氯磺酸-甲酰胺法,反应温度23℃,反应时光8h,氧化除氨pH9.5。采取最佳工艺磺化三个批次的类肝素产品,产物以HPS-1,HPS-2,HPS-3表示,摸索制备硫糖肽的新道路。各批次磺化产物产物采取超滤脱盐,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测纯度。2存在抗胃溃疡作用的活性硫糖肽的筛选及分别纯化无水乙（此处忽略..）醇灌胃处理大鼠,树破大鼠胃溃疡模型,以溃疡指数、病理切片为检测指标,从四种磺化产品中筛选出存在抗胃溃疡活性的硫糖肽SG跟HPS-1。成果表明硫酸基团跟总糖含量较高者,抗胃溃疡活性为强。QFF强阴离子交换层析色谱对活性硫糖肽进行分别纯化,得到不同离子强度的硫糖肽组分SG-1、SG-2、SG-3、SG-4、SG-5以及HPS-1-1、HPS-1-2。3硫糖肽中糖链的开释及硫糖肽分子量的测定采取酶解法开释出活性硫糖肽中的糖链,产物分辨为S-1跟H-1。紫外扫描光谱技巧(UV)考察硫糖肽及其糖链的特点接收情况,成果显示硫糖肽中含有多糖跟氨基酸组分,而糖链中仅有多糖。应用多角度激光散射技巧断定活性硫糖肽各组分的重均分子量Mw,其中SG跟HPS-1分子量分辨为99.54kDa跟33.97kDa。4硫糖肽各组分及糖链部分对大鼠腹腔巨噬细胞成长因子的影响利用贴壁纯化法培养大鼠腹腔巨噬细胞,采取台盼蓝拒染实验跟MTT实验测定硫糖肽各组分及其糖链部分对巨噬细胞的细胞活力的作用,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定大鼠腹腔巨噬细胞上清液中TNF-α跟IL-4的含量。成果显示硫糖肽糖链及其组分对巨噬细胞表示为细胞克制造用,跟着浓度升高,克制造用更加明显,克制造用最明显的为SG-4,其在10μg/mL、100μg/mL、（此处忽略..）250μg/mL、500μg/mL不同浓度下对巨噬细胞的克制率分辨为(1.69±0.32)%、(4.31±0.43)%、(6.16±0.37)%、(8.71±0.82)%。通过硫糖肽对TNF-α跟IL-4表白的克制造用,筛选出疗效较好的组分：SG-3、SG-4,其中RatTNF-α在SG-3浓度分辨为250μg/mL跟500μg/mL中的含量307.40±25.71pg/mL跟230.59±24.42pg/mL,SG-4浓度分辨为250μg/mL跟500μg/mL中RatTNF-a的含量为243.55±4.18pg/mL跟207.18±35.68pg/mL,明显低于模型组508.09±30.53pg/mL,RatIL-4在SG-3浓度分辨为250μg/mL跟500μg/mL中的含量54.98±1.03pg/mL跟46.43±0.55pg/mL,SG-4浓度分辨为250μg/mL跟500μg/mL中RatIL-4的含量为49.98±1.68pg/mL跟43.40±1.20pg/mL,明显低于模型组73.43±4.54pg/mL。初步证明硫糖肽各组分及其糖链部分对巨噬细胞分泌前炎症细胞因子有克制造用。5SG-3跟SG-4对实验性胃溃疡大鼠的医治作用采取改进Okabe法树破大鼠胃溃疡模型,考察SG-3跟SG-4对实验性胃溃疡大鼠的医治作用。溃疡组织HE染色显示不同浓度的SG-3跟SG-4均能医治大鼠胃溃疡。考察了硫糖肽对Caspase3、EGFR、NO、NOS跟EGF、ET-1的表白情况。医治16d后,高剂量的SG-4对上述指标的的表白作用分辨是：caspa（文章此处忽略..）se3克制率为(81.22±1.62)%,EGFR增加2.25±0.11倍,NO降落至(34.55±2.38)μmol/L,cNOS增加至(8.43±0.84)U/mL,iNOS降落至(6.81±1.99)U/mL,EGF增加至(35.49±2.67)pg/mL,ET-1降落至(6.31±0.32)pg/mL,与模型组比拟存在明显差别,并与剂量成正相干,随医治时光跟剂量增加而表示明显的改良作用。通过四个给药组对胃溃疡大鼠Caspase3、EGFR、NO、NOS跟EGF、ET-1表白的明显改良后果,证明了硫糖肽其对胃溃疡大鼠的医治作用。

以上为本篇毕业论文范文硫糖肽的制备及其抗胃溃疡的活性研究的介绍部分。

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