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禽感染性支气管炎病毒S1基因自杀性DNA疫苗的研究

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毕业论文范文题目:禽感染性支气管炎病毒S1基因自杀性DNA疫苗的研究,论文范文关键词:禽感染性支气管炎病毒S1基因自杀性DNA疫苗的研究
禽感染性支气管炎病毒S1基因自杀性DNA疫苗的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:本研究采取本实验室pIBV—S1质粒(DQ288927)构建自杀性DNA疫苗。通过PCR扩增在S1基因两端引入BamHⅠ酶切位点,经酶切插入自杀性DNA疫苗载体pSCA1,构建了自杀性DNA疫苗pSCA1-S1质粒,经过菌落PCR、酶切及测序鉴定目标基因被成功克隆至自杀性DNA疫苗载体pSCA1,且方向正确。以1:20的配比参加脂质体作佐剂,制备了IBVS1基因的自杀性DNA疫苗。为证明所构建自杀性DNA疫苗(略..)pSCA1-S1质粒的正确表白,分辨取等量的重组质粒pSCA1-S1、惯例IBVS1基因DNA疫苗质粒pcDNA-S1、空载体pSCA1转染Vero细胞。48h后经间接免疫荧光实验察看发明,pSCA1-S1以及pcDNAS1转染组细胞浆均可见特异性亮绿色荧光,pSCA1空载体组无荧光为阴性。证明自杀性DNA疫苗载体能成功表白S1基因。为评估IBV自杀性DNA疫苗的免疫后果,分辨用构建的自杀性DNA疫苗(文章此处忽略..)pSCA1-S1、惯例DNA疫苗pcDNAS1、空载体pSCA1跟IBV灭活疫苗、PBS液对比,免疫非免疫健康雏鸡。自免疫后每周采血分别血清持续五周,采取间接ELISA实验检测血清特异性抗体IgG,成果表明:自杀性DNA疫苗产生针对IBV的特异性血清抗体,免疫后第二周回升到峰值,随后开端降落,其抗体程度与惯例IBVDNA疫苗差别不明显(P>0.05)。用流式细胞仪(FACS)测定各组CD3~+、C(此处忽略..)D4~+、CD8~+动态变更,成果显示:自杀性DNA疫苗pSCA1-S1组CD3~+程度在14d跟28d差别明显高于惯例IBVDNA疫苗组(P<0.05);CD4~+程度在21d、35d差别明显高于惯例IBVDNA疫苗组(P<0.05);CD8~+程度只在35d差别明显高于惯例IBVDNA疫苗组(P<0.05)。表明自杀性DNA疫苗能引诱机体产生高程度的细胞免疫。攻毒保护实验成果表明:pSCA1-S1组攻毒绝对保护率为60%;pcDNAS1组免疫(文章此处忽略..)鸡只绝对保护率低于pSCA1-S1,为50%。本研究采取IBVS1基因构建自杀性DNA疫苗对鸡进行免疫,并对其免疫后果进行评估,在国内外还未见报道。本研究为研制IBV“自杀性”DNA疫苗提供了基本材料跟科学根据。


以上为本篇毕业论文范文禽感染性支气管炎病毒S1基因自杀性DNA疫苗的研究的介绍部分。
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