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感染性支气管炎病毒纤突蛋白、核蛋白基因的克隆、表白及其在抗体

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毕业论文范文题目:感染性支气管炎病毒纤突蛋白、核蛋白基因的克隆、表白及其在抗体,论文范文关键词:感染性支气管炎病毒纤突蛋白、核蛋白基因的克隆、表白及其在抗体
感染性支气管炎病毒纤突蛋白、核蛋白基因的克隆、表白及其在抗体毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:鸡感染性支气管炎(Infectiousbronchitis,IB)是由鸡感染性支气管炎病毒(Infectiousbronchitisvirus,IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触性感染病。各种年纪、类型的鸡均易感。该病呈世界分布,是重大迫害养鸡业的重大感染病之一。感染性支气管炎病毒属于冠状病毒科冠状病毒属,为不分节段的单股正链RNA病毒,包含至少3种构造蛋白基因:纤突蛋白(S)基因、核蛋白(N)基因、膜蛋白(M)基因。IBV的S蛋白由S1蛋(此处忽略..)白跟S2蛋白两部分组成,在病毒进化中最为活泼,是最重要的保护性抗原,能刺激机体产生中跟抗体,在病毒吸附细胞过程中发挥重要作用,在血清学分类、疫苗免疫防治上起决定性作用;N蛋白进化上最为保守,重要与基因组核酸的包裹、RNA的复制跟细胞免疫有关,含有大量抗原决定簇,免疫原性仅次于S蛋白,能引诱机体产生大量抗体。自1931年发明该病以来,至少已有二十九种血清型被报道,并且新的血清型跟变异株仍在始终呈现。鉴于此,通过克隆表白存在高度保守(此处忽略..)性的N蛋白基因,并其为诊断抗原树破检测IBV抗体的ELISA法,为监测群体的抗体程度,防备跟把持该病提供坚固的根据跟有效的技巧保障。同时克隆、表白存在型特异性的S1蛋白基因以便为下一步研究该病的基因工程疫苗奠定基本。本课题的重要研究内容包含:1、感染性支气管炎病毒纤突蛋白S1基因跟核蛋白基因的克隆与序列分析以GenBank颁布的IBV基因组的序列为根据,分辨设计针对S1基因跟N基因的特异性引物,通过RT-PCR法从IBV基因组(此处忽略..)中扩增出完全的S1跟N片段,将扩增片段分辨克隆到pMD18-T载体,经酶切跟序列测定,S1、N基因片段大小分辨为1685bp跟1230bp;用BLAST比对发明:S1基因与GX1-98毒株同源性为98%,N基因与H52毒株LKQ3同源性为97%。2、感染性支气管炎病毒纤突蛋白S1基因跟核蛋白基因在大肠杆菌中的表白构建了弃信号肽区S1基因表白载体pGEX-S1跟N基因表白载体pGEX-NP,并成功进行了表白,对表白产物进行SDS-PAGE分析跟Western-blot鉴定,(文章此处忽略..)成果表明S1分子量大概为80kDa;N蛋白表白于细胞质中,有两种重要产物,大小分辨为80kDa跟60kDa,并利用GST亲跟层析柱进行了纯化,获得了相应纯化产物,Western-blot显示纯化产物均能与鸡IBV标准阳性血清产生特异性反应,阐明有很好的免疫学活性。3、基于重组N蛋白的IBV抗体ELISA检测方法的树破


以上为本篇毕业论文范文感染性支气管炎病毒纤突蛋白、核蛋白基因的克隆、表白及其在抗体的介绍部分。
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