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猪肋膜肺炎放线杆菌尿素酶的提取及特点研究

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毕业论文范文题目:猪肋膜肺炎放线杆菌尿素酶的提取及特点研究,论文范文关键词:猪肋膜肺炎放线杆菌尿素酶的提取及特点研究
猪肋膜肺炎放线杆菌尿素酶的提取及特点研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:猪感染性肋膜肺炎是由肋膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumonia;APP)引起的一种猪呼吸道感染病,世界各国均有产生,尤以欧、美各国风行重大。各种年纪的猪均易感染,并常与巴氏杆菌等混淆感染。临床症状以病猪呼吸艰苦为特点,病理变更重要是肺部不同程度的充血、出血跟纤维素性肺炎,其发病率跟逝世亡率常在20%以上,最急性型的逝世亡率可高达80%~100%,假如发展为慢性或埋伏于猪群内,可使猪成长迟缓,豢养本钱增加,抵抗力降落。该(文章此处忽略..)病在我国的产生浮现逐年回升的趋势,给我国的养猪业造成了重大的经济丧失。构成APP致病的毒力因素包含溶血毒素、荚膜多糖、脂多糖、外膜蛋白、转铁结合蛋白、蛋白酶、浸透因子、尿素酶等。研究APP毒力因子的致病作用有利于毒力因子亚单位疫苗或基因工程疫苗的研究,同时对有效疫苗的抉择跟利用,防备跟把持本病也存在重要意思。本研究重要分两个部分:第一部分:猪肋膜肺炎放线杆菌尿素酶的提取纯化及理化特点研究。肋膜肺炎放线杆菌在样品缓冲液中经超声波粉(此处忽略..)碎后,4℃、10000r/min离心20min取上清得到粗提的尿素酶,再经过硫酸铵盐析跟SephadexG-200凝胶过滤层析进行提纯,由SDS-PAGE电泳检测提取物的纯度并测定分子量,以及对尿素酶的理化特点,包含pH(6.0、6.5、7.0、7.5、7.7、8.0、8.5、9.0、9.5)跟温度(25、30、35、40、45、50跟55℃)对尿素酶活性的影响进行了研究。成果表明,APP尿素酶由三个亚单位组成,其分子量分辨为11.0、25.0跟60.0KD;该酶的最适pH为8.5,最适温度为45℃,在该前提下测得酶比活为96.253U/mg。第二部分:猪(本文此处忽略..)肋膜肺炎放线杆菌尿素酶对小鼠免疫原性研究。将制备的APP尿素酶分不同剂量(5、10、15、20、25跟30μg/只)免疫小白鼠,然掉队行同源保护性实验。成果尿素酶在25μg/只的免疫剂量下可对小白鼠产生较强的保护作用。用同血清型菌株对免疫后的小白鼠攻毒,病理学变更为对比组未经免疫直接攻毒的小白鼠全部逝世亡,肺脏重大出血,肝脏肿大出血,而免疫组除免疫5μg组的小白鼠全部逝世亡、肺脏出血重大,肝脏肿大出血外,其余组小鼠的逝世亡率呈降落趋势,与对比组比拟,肺脏出血略(此处忽略..)微;病理组织学变更为对比组肝细胞坏逝世崩解,肺泡内出血重大,肺间质增厚,间质内出血;免疫组也有类似病变,但程度不同,逐步减轻。表明尿素酶在猪感染性肋膜肺炎的免疫保护过程中起必定的作用,该研究为APP亚单位疫苗的研制及利用提供了实际根据。


以上为本篇毕业论文范文猪肋膜肺炎放线杆菌尿素酶的提取及特点研究的介绍部分。
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