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鸡感染性支气管炎重组鸡痘疫苗免疫效力的研究

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毕业论文范文题目:鸡感染性支气管炎重组鸡痘疫苗免疫效力的研究,论文范文关键词:鸡感染性支气管炎重组鸡痘疫苗免疫效力的研究
鸡感染性支气管炎重组鸡痘疫苗免疫效力的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:鸡感染性支气管炎(AvianInfectiousBronchitis)是由冠状病毒属的冠状病毒引起的高度接触性感染病,是重大迫害养鸡业的重要疾病之一。我国在防制鸡感染性支气管炎过程中,目前通常采取马萨诸塞(Massachusetts)血清型疫苗H120,H52,还有很多由处所分别株通过鸡胚致弱制备的商品化活疫苗。但因为我国大量鸡感染性支气管炎病毒不同血清型的呈现,对感染异种IBV分别株而发病的免疫鸡群不能提供完全的保护作用,造成了我国免疫鸡群中IB频繁产生的起因之一。禽痘病毒载体疫苗在出产实际中已被证明为一种保险有效的疫苗,部分产品已经投入利用。本课题组已构建rFPV-S1-IFNγ跟rFPV-S1,前期实验后果良好。本研究对其免疫效力进行了重组鸡痘病毒疫苗同弱毒疫苗比较(此处忽略..)实验、最小免疫剂量测定、保险性、遗传牢固性、不同前提保存对疫苗效价的影响等工作,为疫苗进一步的中试跟推广作铺垫。为了检测重组病毒的遗传牢固性,rFPV-S1-IFNγ与rFPV-S1用鸡胚成纤维细胞接种传代至30代,取第15、20、25、30代重组病毒作为受检代次。病毒蚀斑检测证明,重组病毒的效价在2×10~5高低牢固,X-gal显色后所有蚀斑均呈蓝色;提取重组病毒基因组DNA,分辨用S1跟鸡Ⅱ型烦扰素基因基因特异性引物进行PCR扩增,4个代次的重组病毒rFPV-S1-IFNγ均检测到了大小分辨为660bp跟500bp目标片段,在重组病毒rFPV-S1中也均检测到了660bp的S1基因特异性片段,序列测定表明2个外源基因在细胞传代过程中不产生核苷酸跟氨基酸的改变;间接免疫荧光检测显示各代次重组病毒中插入的外源基(本文此处忽略..)因均能表白,在荧光显微镜下察看到了特异性荧光。成果表明,重组鸡痘病毒存在较好的遗传牢固性,经过30代的传代后外源基因可能牢固表白。将共表白感染性支气管炎病毒S1基因跟鸡Ⅱ型烦扰素基因的重组鸡痘病毒用生理盐水恢复至原体积,取0.1ml翅膀内侧无血管处接种1周龄SPF鸡(相称于1.0×10~5PFU/羽)。成果表明,即便采取原倍重组疫苗打针实验鸡也不会引起实验鸡发病,重组疫苗对实验鸡是保险的。将100只4周龄SPF鸡分为4个组,分辨免疫rFPV-S1-IFNγ、rFPV-S1、H120,并设PBS对比,免后4周用IBVLX4株攻打。成果13/22的鸡免疫rFPV-S1-IFNγ后能获得保护,rFPV-S1免疫组跟H120的保护率分辨是18/24跟17/22。rFPV-S1-IFNγ免疫后能缩短IBV呼吸道排毒时光及病毒抗原在肾脏组织中存在(此处忽略..)时光,仅在攻毒后的6-8d可能在喉拭子跟肾脏组织中检测到病毒跟病毒抗原,比rFPV-S1跟H120弱毒疫苗免疫组分辨缩短了2d。H120弱毒疫苗跟重组鸡痘病毒免疫组肝、脾、肾、肺跟气管的病理变更略微,rFPV-S1-IFNγ免疫组在攻毒后的第16d察看到病理变更,比rFPV-S1跟H120弱毒疫苗免疫组攻毒后病变持续时光短了4d。实验鸡的血清学跟外周血T淋巴细胞亚群的监测表明,疫苗接种后3周全部实验鸡均为IBV抗体阳性,其中,H120弱毒疫苗免疫组抗体程度最高,其次是rFPV-S1免疫组,rFPV-S1-IFNγ免疫组的抗IBV抗体程度最低。除了rFPV-S1-IFNγ免疫组CD4~+T淋巴细胞攻毒前降落较为明显,TCRγδ~+跟CD8~+T淋巴细胞比例是最高的,其余各免疫组外周血CD4~+T、CD8~+T(文章此处忽略..)跟TCRγδ~+淋巴细胞变更程度比较安稳。上述实验成果阐明rFPV-S1-IFNγ促进了CD8~+T淋巴细胞的成熟,克制外周血中CD4~+T淋巴细胞数量。进步了机体的细胞免疫程度,限度了机体B淋巴细胞的活化以及特异性抗体的产生;同时,rFPV-S1-IFNγ还能克制活疫苗免疫接种引起的实验鸡增重降落作用,rFPV-S1-IFNγ的免疫实验鸡的增重不受到疫苗接种的影响,与rFPV-S1跟H120弱毒疫苗免疫组有明显差别。


以上为本篇毕业论文范文鸡感染性支气管炎重组鸡痘疫苗免疫效力的研究的介绍部分。
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