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鸡感染性支气管炎病毒S1基因与鸡IL-18基因在禽痘病毒载体中的共

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毕业论文范文题目:鸡感染性支气管炎病毒S1基因与鸡IL-18基因在禽痘病毒载体中的共,论文范文关键词:鸡感染性支气管炎病毒S1基因与鸡IL-18基因在禽痘病毒载体中的共
鸡感染性支气管炎病毒S1基因与鸡IL-18基因在禽痘病毒载体中的共毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:为研究河南IBV的分子风行病学背景,开发有效地新型疫苗。咱们从河南省汝州市暴发鸡感染性支管炎(IB)的鸡群中分别出1株病毒。因为我国鸡感染性支气管炎病毒(IBV)不同血清型的呈现,对感染异种IBV分别株而发病的鸡群不能提供完全保护作用,这造成了我国免疫鸡群中IB频繁产生的起因之一。禽痘病毒载体疫苗在出产实际中已被证明为一种保险有效的疫苗,部分产品已经投入利用。本研究重要获得重组病毒rFPV-S1跟rFPV-S1-ChIL-18,为其免疫效力的研究奠定了基本。根据GenBank中已发表的IBVS1基因,设计并合成了1对引物,采取RT-PCR技巧扩增IBV河南分别株(I(此处忽略..)BV-HN05)S1基因,并进行克隆跟测序。成果表明,所克隆的片段大小为1739bp,包含S1基因跟部分S2基因,S蛋白切割辨认位点序列为RRSRR。序列比较分析发明,IBVHN05株S1基因与吉林JAAS株S1基因核苷酸同源性为99.8%,氨基酸同源性为99.3%,而与其它支气管炎病毒株核苷酸同源性为78.1%-84.2%。通过IBVS1基因体系进化分析,成果发明HN05株与JAAS株的亲缘关联最近,而与其它支气管炎病毒株的亲缘关联均较远。为了构建IBVS1基因重组禽痘病毒,将其亚克隆到含有LP2EP2迟早期启动子的载体pSY538的BamHI位点,将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因平端克隆到质粒pSY681的SfiI位(文章此处忽略..)点,而后切下S1片段再亚克隆到禽痘病毒载体pSY681的NotI位点,用脂质体将其转染已感染亲本禽痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,在含有X-gal的养分琼脂培养基长进行蓝斑筛选,获得重组病毒rFPV-S1,通过PCR跟酶切进行鉴定。成果表明获得包含有IBVS1基因的禽痘病毒并且存在牢固的遗传性状。以间接免疫荧光法证明感染rFPV-S1的CEF中存在表白的S1蛋白,为研发鸡感染性支气管炎病毒重组禽痘病毒疫苗奠定了基本。共表白IBVS1基因与鸡IL-18基因的重组鸡痘病毒的构建,将含有LP2EP2启动子的ChIL-18基因克隆至含有S1基因的重组禽痘病毒rFPV-S1的上游(略..),用脂质体将其转染已感染亲本禽痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,在含有X-gal的养分琼脂培养基长进行蓝斑筛选,获得重组病毒rFPV-S1-ChIL-18,通过PCR跟酶切进行鉴定。成果表明获得包含有IBVS1基因跟ChIL-18的重组禽痘病毒并且存在牢固的遗传性状。以间接免疫荧光法证明感染rFPV-S1-ChIL-18的CEF中存在表白的S1蛋白;以T细胞转化实验证明感染rFPV-S1-ChIL-18的CEF中可能表白ChIL-18蛋白;抗病毒效价测定表明重组禽痘病毒rFPV-S1-ChIL-18存在抗水泡性口炎病毒活性。为研发鸡IL-18基因跟感染性支气管炎保护性抗原基因的(本文此处忽略..)重组禽痘病毒疫苗奠定了基本。本研究成功获得了IBVS1基因全序列;成功获得了重组禽痘病毒rFPV-S1并能在CEF中进行实在表白。成功获得了重组禽痘病毒rFPV-S1-ChIL-18,并存在必定的抗病毒活性,可能进步机体的细胞免疫程度。为开发利用鸡IL-18的佐剂效应及构建共表白鸡IL-18基因跟保护性抗原基因的重组禽痘病毒疫苗奠定基本。


以上为本篇毕业论文范文鸡感染性支气管炎病毒S1基因与鸡IL-18基因在禽痘病毒载体中的共的介绍部分。
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