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游离脂肪酸对人脐静脉内皮细胞eNOSmRNA及ET-1mRNA表白程度的影响

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毕业论文范文题目:游离脂肪酸对人脐静脉内皮细胞eNOSmRNA及ET-1mRNA表白程度的影响,论文范文关键词:游离脂肪酸对人脐静脉内皮细胞eNOSmRNA及ET-1mRNA表白程度的影响
游离脂肪酸对人脐静脉内皮细胞eNOSmRNA及ET-1mRNA表白程度的影响毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标:2型糖尿病患者中有40~50%合并脂代谢异样。有材料表明胰岛素抵抗跟/或2型糖尿病患者广泛存在血清游离脂肪酸(freefattyacids,FFAs)程度升高,而且成为糖耐量减低(IGT)的独破危险标记。目前大多数学者认为糖尿病血管病变与内皮功能受损密切相干。研究发明糖尿病患者存在内皮依附性的血管舒张(EDVR)减弱,而这种异样变更在糖尿病血管病变中起了重要作用。以内皮素(ET-1)为代表的内皮源血管紧缩因子(endothelium-derivedcontractingfactor,EDCF)与一氧化氮(NO)为代表的内皮源血管舒张因子(endothelium-derivedrelaxingfactor,EDRF)的分泌跟调节功能均衡失调,是内皮功能异样跟内皮细胞伤害的重要特点。有材料及咱们前期的研究工作已经表明2型糖尿病病人存在明显的FFAs升高。在体外人脐静脉血管内皮细胞的培养实验中证明,不同浓度FFA可影响内皮细胞NO跟ET-1的开释。本研究旨在用不同品种及不同浓度的游离脂(本文此处忽略..)肪酸对离体培养人血管内皮细胞eNOSmRNA跟ET-1mRNA表白程度的影响,以懂得FFA使血管内皮细胞NO跟ET-1分泌异样的调节程度,探讨高血清FFAs浓度的糖尿病患者合并大血管病变的可能机制,并且为早期恢复内皮细胞生理功能跟防治心血管疾病开辟新思路方法:所用的细胞为人脐静脉内皮细胞株ECV304,培1WP=4中文摘要养基采取M199培养基(含20%胎牛血清,青霉素,链霉素,L-谷氨酰胺),在5%CO2细胞培养箱中370C孵育培养。将游离脂肪酸分辨配制成游离脂肪酸/0.1NNaOH溶液,用超生乳化法充分溶解。每5ml培养基中分辨参加已配置好的200uml/mlFFA溶液2.5ul,5ul,10ul,15ul以配制成FFA浓度分辨为100umol/L,200uml/L,400umol/L,600umol/L的20%胎牛血清的M199培养基。利用含相应体积0.1NNaOH溶液的培养基培养的细胞组作为对比组F组。实验组按照给予脂肪酸品种不同分为A、B、C、D、E组,各组分辨给予不同浓度的脂肪酸,置于5%CO2细胞培养箱中370C孵育培养24小时。用TRIZOL试剂进行细胞总R(文章此处忽略..)NA的提取。经过完全性跟纯度的检测附跟请求后,进行RT-PCR反应。扩增产物混淆溴酚蓝加样于1%的琼脂糖凝胶中电泳,以凝胶成像分析仪分析各个DNA条带灰度值,并进行拍照。各个反应体系以GAPDHmRNA的RT-PCR产物为内参照,打算待定mRNA的RT-PCR产物与其灰度比值,作为mRNA的表白值。用SAS统计软件进行统计学处理,以分析实验成果。成果:当C18:1组、C18:2组FFA浓度等于或高于200umol/L时,eNOSmRNA表白减低。其余各组C16:0、C18:0、C24:0组与对比比拟较,无明显差别(P0.05)。C18:1组各浓度分辨与C18:2组各浓度FFA情况下的eNOSmRNA表白情况比拟较,后者的克制造用更明显(P0.05)。C18:1组目标基因灰度比均匀值随浓度增加顺次降落(P0.05)。C18:2各浓度组间比较,跟着FFA浓度增加,eNOSmRNA表白程度减低。C18:1组以及C18:22WP=5中文摘要组各浓度FFA前提下,ET-1mRNA表白程度减低,与对比组比拟差别有明显性(P0.05)。C16:0、C18:0、C24:0组,FFA浓度为200umol/L以及(本文此处忽略..)高于此浓度前提下,ET-1mRNA表白程度增高,与对比组比拟较差别有明显性(P0.05)。C18:1组与C18:2组各个浓度FFA前提下ET-1mRNA表白随FFA浓度的增高而减低,差别有明显性(P0.05)。C24:0、C16:0各浓度组显示,ET-1mRNA表白随此FFA浓度的增高而加强,差别有明显性(P0.05)。将含有18个碳原子的C18:0、C18:1、C18:2各组雷同FFA程度比拟较,ET-1mRNA表白程度顺次降落(P0.05)。对于不同FFA作用于血管内皮细胞对其eNOSmRNA扩增产物电泳条带灰度/ET-1mRNA扩增产物电泳条带灰度的比值:C18:1、C18:2组各个浓度FFA前提下,所测得两个目标基因扩增产物电泳条带灰度比值高于对比组,差别有明显性(P0.05)。C16:0、C18:0、C24:0各组各个浓度FFA前提下,所测得两个目标基因扩增产物电泳条带灰度比值低于对比组,差别有明显性(P0.05)。将C18:0、C18:1、C18:2各组同浓度FFA前提下两个目标基因扩增产物电泳条带灰度比值进行比较,可见比值顺次升高有明显意思(P0.05)。比较C16:0、C18:0、C24:0各组同浓度FFA前提(略..)下两个目标基因扩增产物电泳条带灰度比值,未发明明显差别(P0.05)。论断:1.FFAs对内皮细胞eNOSmRNA表白程度的影响与脂肪链长度无关。2.不饱跟脂肪酸降落eNOSmRNA表白程度,对ET-1mRNA表白存在克制造用;两种克制造用比拟较,前者强于后者,3WP=6中文摘要提示不饱跟脂肪酸偏向于保护血管舒张功能。3.不饱跟脂肪酸对eNOSmRNA表白程度的克制造成NO合成的克制,具体作用有待进一步探讨。4.饱跟脂肪酸呈浓度依附性促进ET-1


以上为本篇毕业论文范文游离脂肪酸对人脐静脉内皮细胞eNOSmRNA及ET-1mRNA表白程度的影响的介绍部分。
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