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产胆盐水解酶(BSH)双歧杆菌的鉴定及其基因的克隆研究

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毕业论文范文题目:产胆盐水解酶(BSH)双歧杆菌的鉴定及其基因的克隆研究,论文范文关键词:产胆盐水解酶(BSH)双歧杆菌的鉴定及其基因的克隆研究
产胆盐水解酶(BSH)双歧杆菌的鉴定及其基因的克隆研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:胆盐水解酶(BileSaltHydrolase,BSH)是益生菌在生长繁殖的过程中分泌的一种代谢产物。该酶能将胃肠道内的结合胆盐水解,形成氨基酸以及溶解性较低的游离胆酸,而游离胆酸与人体内的胆固醇相结合产生沉淀,从而在一定程度上降低人体血清中胆固醇的含量,进而减少人类心血管疾病的发病几率。本文首先对双(文章此处忽略..)歧杆菌产生胆盐水解酶进行鉴定,然后采用16SrRNA分子生物学技术对该菌进行了分类鉴定,并对其胆盐水解酶基因进行克隆与序列分析,具体研究内容如下:1.本试验将双歧杆菌接种到改良的TPY培养基中进行培养,经过对该菌产生的胆盐水解酶进行定性与定量的分析,结果表明双歧杆菌产生具有一定活力的胆盐水解酶,为胆盐水(本文此处忽略..)解酶基因的研究提供可参考的理论依据。2.采用16SrRNA分子生物学技术对双歧杆菌进行分类鉴定,将扩增的PCR产物进行回收纯化,测序后该菌的16SrRNA为1488bp,在NCBI上进行在线BLAST比对,得知该菌与两歧双歧杆菌的同源性达到99%,确定试验室保藏的双歧杆菌为两歧双歧杆菌。3.根据菌种鉴定的结果得知与其亲缘关(此处忽略..)系最近的菌种,通过其菌种的胆盐水解酶基因序列设计—对引物,以两歧双歧杆菌的基因组DNA为模板进行PCR扩增,回收产物与pMD19-T载体进行连接,将重组克隆质粒pMD19-BSH转入到大肠杆菌JM109感受态细胞中,筛选出阳性的重组菌,对重组克隆质粒进行PCR鉴定与酶切鉴定后,将重组克隆菌进行基因的测序,胆盐水(略..)解酶基因大小为951bp。测序结果在NCBI上进行在线BLAST比对,目的基因的序列与NCBI上公布的胆盐水解酶基因的同源性达到99%,应用DNAMAN软件翻译成317个氨基酸序列后,进行比对得知同源性达到99%,表明胆盐水解酶基因克隆成功。


以上为本篇毕业论文范文产胆盐水解酶(BSH)双歧杆菌的鉴定及其基因的克隆研究的介绍部分。
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