猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表白

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猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表白

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猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表白毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：猪繁殖与呼吸综合征（porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的急性接触性感染病,1987年首次产生于美国，随后在世界各地传播。1996年郭宝清等首次报道本国分别到P（本文此处忽略..）RRSV病原，目前本病已成为迫害养猪业的重要疾病之一。树破针对该病的疾速、有效的检测方法是为我国猪群PRRSV进行风行病学考察及猪群免疫的重要基本。PRRSVORF7编码病毒的核衣壳蛋白（N）是病毒的重要构造蛋白，免疫原性强且在型内高度保守。本实验（本文此处忽略..）根据PRRSV美洲型代表毒株的基因序列，设计了可能扩增其N基因的一对含有HindIII跟BamHI酶切位点的引物，经RT-PCR技巧克隆出大小为372bp的基因片段，将该片段克隆到pMD18-T载体，测序后，利用blast工具将其与GeneBank上美洲型（略..）代表毒株序列进行了比较，成果表明该基因与美洲型代表毒株序列完全同源。将此基因亚克隆到pRESTB表白载体中，构建了表白质粒pREST-N。将重组质粒转化入大肠杆菌BL21（DE3）PlysS，用IPTG进行引诱表白，成果表白出约17.7ku的融合蛋白。蛋白大（本文此处忽略..）小与预期相符，经Western-Blot免疫印迹分析，该表白产物与兔抗PRRSV高免血清反应，阐明PRRSV核衣壳蛋白基因在原核体系获得有效表白，为进一步树破PRRSV免疫学诊断提供了重要的物质基本。

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