支架蛋白Gab1调控肺泡名义活性蛋白以及LPS介导急性肺伤害的作用

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支架蛋白Gab1调控肺泡名义活性蛋白以及LPS介导急性肺伤害的作用

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毕业论文范文题目：支架蛋白Gab1调控肺泡名义活性蛋白以及LPS介导急性肺伤害的作用，论文范文关键词：支架蛋白Gab1调控肺泡名义活性蛋白以及LPS介导急性肺伤害的作用
支架蛋白Gab1调控肺泡名义活性蛋白以及LPS介导急性肺伤害的作用毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景：急性肺伤害(acutelunginjury,ALI)是因为感染、休克跟创伤等多种起因引起的肺部并发症,可进一步发展为急性呼吸窘迫综合征(acuterespiratorydistresssyndrome,ARDs)。临床上以重大低氧血症、弥漫性肺部浸润跟肺适应性降落为特点,其发病机制迄今尚未完全阐明,临床医治手段也非常有限。Gab1作为支架蛋白与多种酪氨酸磷酸酶受体相偶联,在分子信号通路传导过程中起重要作用。在急性肺伤害中很多基因发明与上皮细胞伤害/凋亡相干联,但支架蛋白Gab1在调控肺泡或者上皮细胞稳态过程中研究仍然未知。目标：利用Cre/Lox（文章此处忽略..）P体系树破肺泡ⅡI型上皮细胞特异性Gab1基因敲除小鼠并进行初步表型分析,并在急性肺伤害过程中研究Gab1在保持肺泡名义活性稳态中的作用。实验方法：本研究抉择了肺泡Ⅱ型上皮细胞特异性表白反式激活元件的转基因小鼠(SPCrtTA)作为介导敲除的工具鼠,将其与表白(TetoCre)重组酶的转基因小鼠交配获得了SPCrtTA-TetoCre双转基因小鼠,接着用SPCrtTA-TetoCre双转基因小鼠与Gab1前提基因打靶小鼠交配获得了可引诱型肺泡Ⅱ型上皮细胞特异性Gab1基因敲除小鼠,三重转基因小鼠在强力霉素的引诱下使得Gab1在肺泡Ⅱ型上皮细胞中产生特异性缺失（本文此处忽略..）,肺泡Ⅱ型上皮细胞Gab1基因敲除小鼠无胚胎致逝世,可能顺利出生。Gab1在肺泡上皮细胞的表白通过mRNA程度跟蛋白程度进行评估,LPS通过气道给药的方法对肺泡造成强烈的伤害,急性肺伤害的程度则通过组化以及酶联免疫吸附等实验进行检测。实验成果检测方法：(1)强力霉素给药7天,引诱小鼠Gab1在肺泡Ⅱ型上皮细胞中缺失后以体积描记法断定小鼠肺动态适应性(Cdyn).(2)小鼠进行右侧支气管肺泡灌洗,灌洗液(BALF)收集1hr内取0.2ml,用白细胞计数液倍比稀释掉队行白细胞计数。用酶联免疫吸附法检测BALF中的IL-1,IL-6,TNF-alfa等炎症因子程度。(3)取未灌洗的肺组织,（此处忽略..）经过10%甲醛溶液中固定,漂洗、脱水、透明跟石蜡包埋。切片惯例化蜡、梯度酒精下入水,进行HE染色。(4)提取小鼠肺组织蛋白,用免疫印迹电泳方法观测肺名义活性蛋白(SPA,SPB,SPC,SPD)表白情况。(5)小鼠气道内滴注LPS24hr后,检测BALF中白细胞总数,肺组织病理以及肺泡名义活性蛋白表白。(6)采取两组间均数t测验,P0.05为有明显性差别,P0.01为有非常明显性差别。实验成果：肺组织切片后HE染色成果显示Gab1敲除小鼠肺组织状况基本畸形,模型组合乎ALI改变；Gab1敲除小鼠肺动态适应性降落,肺泡名义活性蛋白表白降落,且并未引起炎症反应。LPS刺激,Gab1敲除小鼠引起（略..）一个更为重大的炎症反应,白细胞计数表明炎症细胞明显增多,BALF中炎症因子表白回升,Realtime-PCR成果表明肺泡Ⅱ型上皮细胞中肺泡名义活性蛋白表白明显降落。论断1,本研究成功树破了肺泡Ⅱ型上皮细胞特异性Gab1基因敲除小鼠2,小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Gab1的缺失降落了肺泡名义活性蛋白的表白同时也影响了小鼠畸形的肺功能3,在LPS引诱的急性肺伤害反应过程中,肺泡Ⅱ型上皮细胞Gab1的缺失诱发更为重大的炎症反应

以上为本篇毕业论文范文支架蛋白Gab1调控肺泡名义活性蛋白以及LPS介导急性肺伤害的作用的介绍部分。

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