Galectin-3-siRNA烦扰对食管癌细胞系Eca-109增殖的影响

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Galectin-3-siRNA烦扰对食管癌细胞系Eca-109增殖的影响

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毕业论文范文题目：Galectin-3-siRNA烦扰对食管癌细胞系Eca-109增殖的影响，论文范文关键词：Galectin-3-siRNA烦扰对食管癌细胞系Eca-109增殖的影响
Galectin-3-siRNA烦扰对食管癌细胞系Eca-109增殖的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标:食管癌是消化系同一种常见的恶性肿瘤,占所有恶性肿瘤的2%,我国事食管癌的高发区,因食管癌逝世亡者仅次于胃癌而居第二位,然而其产活力制尚未完全明白。肿瘤的产生是一个长期的并且是多因素,多步骤的复杂过程,包含细胞的增殖跟分化、细胞的凋亡、细胞的粘附、躲避机体免疫体系、新生血管的构成跟肿瘤的浸润、转移等。Galectin-3蛋白作为半乳凝集素家族的一员,目前研究认为其广泛表白于畸形组织跟肿瘤组织,与肿瘤的产生、发展、转移跟侵袭有着密切的关联。RNA烦扰(RNAinterference,RNAi)是一种核酸序列特异性禁止基因功能的有效工具,能高效并且特异克制目标基因的表白。有研究发明用RNAi技巧禁止肿瘤相干基因的表白可能有效地克制肿瘤细胞的增殖。本实验通过设计合成针对Galectin-3蛋白特异性的小烦扰RNA(shortinterferingRNA,siRNA)表白载体,而后采取Galectin-3-siRNA烦扰技巧作用于食管癌细胞系Eca-109,从而来研究烦扰前后Galectin-3、CyclinD1蛋白表白及细胞增殖跟细胞周期的改变,进一步探究Galectin-3蛋白对食道癌细胞系Eca-109细胞增殖跟细胞周期的影响以及与CyclinD1之间的关联,从而为食管癌的产活力制提供实验研究材料,为食管癌的临床（此处忽略..）医治提供有价值的参考指标。方法:采取食管癌细胞系Eca-109为研究对象,设计合成针对Galectin-3的特异性siRNA并转染进食管癌Eca-109细胞。将实验分为转染组、空白对比组、阳性对比组、阴性对比组。采取MTT法检测各组食管癌细胞系Eca-109增殖情况,以检测的光密度值(OD值)代表各组的增殖情况,并打算各组的克制率;采取免疫细胞化学方法检测实验各组食管癌细胞系Eca-109中Galectin-3、CyclinD1蛋白的表白,采取HIPAS-2000型打算机图像采集体系,在×200倍视线中采集图像,用Imageproplus5.0(IPP)测定阳性细胞的累积光密度值IOD,每张切片选5个视线并求其均值。利用流式细胞仪检测各组食管癌细胞系Eca-109的细胞周期变更,所得成果用细胞周期拟跟软件ModFit分析。数据采取方差分析跟双变量的相干性分析进行统计学分析,以p0.05表示差别有统计学意思。成果:1.转染效力的检测:利用FAM标记的NegativesiRNA转染食管癌细胞Eca-1096h后用流式细胞仪检测转染效力,转染效力为69.60%。2.利用倒置相差显微镜进行细胞学察看,Galectin-3-siRNA转染后48h后细胞状况变更明显,转染组细胞与阴性对比组跟空白对比组细胞比拟细胞体积变小并趋势于均一,多数细胞由梭形趋势变圆,核浆比变小,瘤巨细胞减少,与（文章此处忽略..）空白对比组比拟较细胞成长迟缓,部分细胞逝世亡并脱落。3.MTT检测成果显示:Galectin-3-siRNA转染进细胞48h当前,克制了食管癌细胞系Eca-109的成长,转染组中各组与阳性对比组490nm波长处吸光度值分辨为0.63±0.13、0.58±0.19、0.76±0.09、0.77±0.18,明显小于空白对比组(1.43±0.12)跟阴性对比组(1.65±0.14),转染组、阳性对比组与空白对比组跟阴性对比组比拟较,差别均有明显统计学意思(p0.05),转染各组细胞克制率分辨为55.85%、59.71%、46.17%。4.免疫细胞化学检测成果显示:利用Galectin-3-siRNA转染食管癌细胞系Eca-109后48hGalectin-3蛋白表白降落,免疫细胞化学染色明显变浅,利用IPP图像分析体系检测转染组中各组的IOD值分辨为20.45±0.15、20.33±0.24、20.36±0.22,空白对比组IOD值为58.15±0.22,阴性对比组IOD值为57.65±0.43,阳性对比组IOD值为19.85±0.67;转染组、阳性对比组与空白对比组跟阴性对比组比拟较,差别均有明显统计学意思(p0.05)。利用Galectin-3-siRNA转染食管癌细胞系Eca-109后48hCyclinD1蛋白表白降落,免疫细胞化学染色明显变浅,转染组中各组的IOD值分辨为39.98±0.05、39.53±0.82、40.86±0.85,空白对比组IOD值为61.83±0.53,阴性对比组IOD值为62.28±0.57,阳性对比组IOD值为40.42±0.60;转染组、阳性对比组与空白对比组跟阴性对比组比拟较,差别均有明（本文此处忽略..）显统计学意思(p0.05)。根据免疫细胞化学成果以IOD作为半定量分析数据,转染后48h转染各组跟阳性对比组Galectin-3蛋白跟CyclinD1蛋白的IOD值均降落,统计学相干性分析显示Galectin-3蛋白跟CyclinD1蛋白存在相干性(r=0.806,p=0.000),跟着Galectin-3蛋白的表白减少,CyclinD1蛋白也相应的降落。5.流式细胞仪检测成果显示:Galectin-3-siRNA转染食管癌细胞系Eca-10948h后,转染组、阳性对比组的G1期细胞数百分比较空白对比组跟阴性对比组明显升高,S期细胞数百分比较空白对比组跟阴性对比组则明显减少。转染组、阳性对比组的G1期细胞百分比数分辨为65.76±0.45、66.42±0.17、65.10±0.67、65.44±0.42,阴性对比组跟空白对比组G1期细胞数分辨为36.76±0.15、35.63±0.36,转染组、阳性对比组与空白对比组跟阴性对比组比拟较,差别均有统计学意思(p0.05)。转染组、阳性对比组的S期细胞数百分比分辨为23.13±1.34、23.19±1.28、24.40±2.17、24.32±1.73,阴性对比组跟空白对比组S期细胞数分辨为46.79±0.76、45.33±0.72,转染组、阳性对比组与空白对比组跟阴性对比组比拟较,差别均有统计学意思(p0.05)。论断:将设计合成的针对Galectin-3的特异性siRNA转染进食管癌细胞系Eca-10948h后,肿瘤细胞的成长受到克制,明显降落了食管癌细胞系Eca-109中Galectin-3蛋白跟（本文此处忽略..）CyclinD1蛋白的表白,使细胞成长阻滞在G1期,转染组G1期细胞数明显高于非转染组跟阴性对比组。阐明Galectin-3在食管癌细胞系Eca-109增殖调控中与CyclinD1蛋白的表白密切相干,而独特发挥作用,利用RNAi技巧禁止肿瘤相干基因的表白可能有效地克制肿瘤细胞的成长,有可能为肿瘤的诊断与医治提供了一种新的重要手段。

以上为本篇毕业论文范文Galectin-3-siRNA烦扰对食管癌细胞系Eca-109增殖的影响的介绍部分。

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