四个miniSTR基因座荧光复合分型体系的构建及其法医学利用

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四个miniSTR基因座荧光复合分型体系的构建及其法医学利用

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毕业论文范文题目：四个miniSTR基因座荧光复合分型体系的构建及其法医学利用，论文范文关键词：四个miniSTR基因座荧光复合分型体系的构建及其法医学利用
四个miniSTR基因座荧光复合分型体系的构建及其法医学利用毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标:miniSTR技巧即在设计引物时,使其结合在更凑近核心反复序列的区域,PCR扩增的产物就会比STR基因座更短一些,可进步高度降解检材的检测成功率。大量研究证明,miniSTR检测技巧对高度降解检材是很有效的一种手段。2006年美国AB公司研制开发了minifiler试剂盒,目前已被利用到实际案件的分析中。但minifiler试剂盒仅包含8个CODIS体系(DNA结合索引体系)内的STR基因座,其体系效力不足以进行个人辨认及亲缘关联鉴定。因此,为了研究更多的miniSTR基因座,并为研制国产化试剂盒做筹备,本实验室自2005年以来研究了Hill等[1]报道的26个非CODIS体系miniSTR基因座在中国汉族人群的群体遗传学特点,并从中筛选出12个多态性较好的基因座用于研发复合分型试剂盒,目前已经成功构建了两组共包含8个miniSTR基因座的复合分型体系。本研究在我实验室既往成果的基本上持续构建第三组miniSTR复合分型体系,包含D6S474、D20S482、D4S2408跟D6S1017四个miniS（本文此处忽略..）TR基因座,用分子克隆的技巧制备其等位基因分型标准物,考察四个基因座在中国汉族及回族人群中的遗传多态性,并探讨其法医学利用价值。方法:采取Chelex-100法提取135份中国汉族跟114份中国回族无关健康个体全血基因组DNA。利用荧光复合扩增技巧扩增D6S474、D20S482、D4S2408跟D6S1017四个miniSTR基因座,ABI310/3130基因分析仪对产物进行检测,Genemapper3.2软件分析成果。根据电泳成果对反应体系中的引物浓度、Mg2+浓度、DNA模板量、退火温度、轮回次数等前提进行优化,以获得最佳反应前提。用构建的复合体系对所有样本的四个miniSTR基因座进行PCR复合扩增。根据所有样本的群体遗传学研究成果,利用分子克隆技巧制备四个基因座的等位基因分型标准物,并按照国际法医遗传学会(internationalsocietyofforensicgenetics,ISFG)推荐的命名准则对各等位基因进行命名。根据构建的等位基因分型标准物及测序成果对所有样本复合扩增产物进行等位基因命名,打（此处忽略..）算各基因座等位基因频率及法医学参数。对构建的荧光标记miniSTR复合扩增体系进行灵敏度、腐败降解检材DNA检测才能的研究,并与商品化STR试剂盒进行比较。成果:本研究成功树破了荧光标记miniSTR复合扩增体系,并用分子克隆技巧制备了miniSTR基因座的等位基因分型标准物。利用该分型体系进行群体遗传学研究发明:D6S474、D20S482、D4S2408跟D6S1017基因座在135份中国汉族无关个体中分辨检出7、8、6、6个等位基因跟14、18、14、14种基因型;在114份中国回族无关个体中分辨检出6、7、5、7个等位基因跟15、23、13、17种基因型。基因型频率分布经χ2测验均合乎Hardy-Weinberg均衡(P0.05)。四个基因座在中国汉族人群的杂合度察看值(Ho)顺次为0.748、0.711、0.748、0.659;在中国回族人群顺次为0.759、0.706、0.714、0.804。在中国汉族人群的多态信息含量(PIC)顺次为0.68、0.66、0.67、0.64;在中国回族人群顺次为0.70、0.73、0.69、0.68。在中国汉族人群的非父打消率(PE)顺次为0.507、0.446、0.507、0.368;在中国回族人群顺次为0.525、0.438、0.451、0.606。在中国汉族人群的个人辨认力(DP)顺（文章此处忽略..）次为0.874、0.871、0.862、0.851;在中国回族人群顺次为0.884、0.911、0.880、0.860。四个miniSTR基因座的累积非父打消率在中国汉族人群为0.914902,在中国回族人群为0.942257;累积个人辨认力在中国汉族人群为0.999666,在中国回族人群为0.999827。体系灵敏度研究:本研究构建的miniSTR复合扩增体系对0.0625ng的DNA仍可进行四个基因座的正确分型。腐败降解检材研究:成果显示对降解五个月的血液检材DNA跟用DNaseI消化25min的DNA,利用miniSTR复合扩增体系分析在四个基因座中均得到了完全分型,显示了miniSTR技巧比惯例STR试剂盒对降解检材存在更高的分型成功率。论断:本研究成功树破了四个miniSTR基因座D6S474、D20S482、D4S2408跟D6S1017的荧光标记复合扩增体系并利用分子克隆技巧制备了四个基因座的等位基因分型标准物。将自制的等位基因分型标准物利用于中国汉族跟回族人群的群体遗传学研究,发明四个基因座存在较好的遗传多态性。本实验树破的荧光标记复合扩增体系分型成果正确,灵敏度达0.0625ng,对分析微量、降解检（文章此处忽略..）材的成功率较惯例STR试剂盒明显进步,可用于法医学亲权鉴定与个人辨认,特别合实用于高度腐败降解检材的DNA检测,可作为惯例STR试剂盒的补充,进步体系效力,同时为开发国产化miniSTR试剂盒奠定了基本。

以上为本篇毕业论文范文四个miniSTR基因座荧光复合分型体系的构建及其法医学利用的介绍部分。

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