毕业论文范文网-论文范文
电气工程 会计论文 金融论文 国际贸易 财务管理 人力资源 学前教育 德语论文 工程管理 文化产业 工商管理 会计专业 行政管理 广告学
机械设计 汉语文学 英语论文 物流论文 电子商务 法律论文 工商管理 旅游管理 市场营销 药学论文 播音主持 人力资源 金融论文 保险学
制药工程 生物工程 包装工程 模具设计 测控专业 工业工程 教育管理 行政管理 计算机论 电子信息 市场营销 法学论文 财务管理 投资学
体育教育 小学教育 印刷工程 土木工程 书法论文 护理论文 心理学论 信息管理 公共事业 给水排水 新闻专业 摄影专业 广电编导 经济学
  • 范文首页 |
  • 毕业论文 |
  • 论文范文 |
  • 计算机论文 |
  • 外文翻译 |
  • 工作总结 |
  • 工作计划 |
  • 现成论文 |
  • 论文下载 |
  • 教学设计 |
  • 免费论文 |
  • 原创论文 |
搜索 高级搜索

原创毕业论文

当前位置:毕业论文范文网-论文范文 -> 免费论文 -> 医药医学论文

人胎盘来源的间充质干细胞向血管内皮细胞分化潜能的研究

作者: 浏览:5次
免费专业论文范文
免费专业论文
政治工作论文
计算机论文
营销专业论文
工程管理论文范文
医药医学论文范文
法律论文范文
生物专业论文
物理教学论文范文
人力资源论文范文
化学教学论文范文
电子专业论文范文
历史专业论文
电气工程论文
社会学专业论文
英语专业论文
行政管理论文范文
语文专业论文
电子商务论文范文
焊工钳工技师论文
社科文学论文
教育论文范文
数学论文范文
物流论文范文
建筑专业论文
食品专业论文
财务管理论文范文
工商管理论文范文
会计专业论文范文
专业论文格式
化工材料专业论文
英语教学专业论文
电子通信论文范文
旅游管理论文范文
环境科学专业论文
经济论文
人力资源论文范文
营销专业论文范文
财务管理论文范文
物流论文范文
财务会计论文范文
数学教育论文范文
数学与应用数学论文
电子商务论文范文
法律专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文
计算机专业论文
环境艺术专业论文
信息计算科学专业
物流专业论文范文
人力资源论文范文
教育管理论文范文
现代教育技术论文
小学教育论文范文
机械模具专业论文
报告,总结,申请书
理工科专业论文
心理学论文范文
学前教育论文范文



毕业论文范文题目:人胎盘来源的间充质干细胞向血管内皮细胞分化潜能的研究,论文范文关键词:人胎盘来源的间充质干细胞向血管内皮细胞分化潜能的研究
人胎盘来源的间充质干细胞向血管内皮细胞分化潜能的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标促进血管新生、改良微轮回是医治缺血性疾病如冠状动脉硬化性心脏病、脑血管疾病跟四周动脉闭塞性疾病的关键。“医治性血管生成”是目前新提出的概念,其与传统的药物、参与外科手术等医治手段不同,是通过模仿体内血管天活力制来达到促进血管新生,改良侧支轮回的目标。其中种子细胞来源是血管组织工程的瓶颈,而内皮细胞(endothelialcells,ECs)是组织工程化血管中急需解决的种子细胞之一。目前已有研究者从不同干细胞分化ECs,如胚胎干细胞、胚胎的成血管细胞、内皮前体细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)跟多潜能成体干细胞[4],但这多少种细胞系在体内含量很少,且受各种因素限度不易获得。2004年,Oswald等人首次成功在体外引诱骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)向血管内皮细胞分化,因此,MSCs可能成为分化为内皮细胞幻想的种子细胞来源。但人骨髓中的MSCs含量极低,大概1×104-1×105个单核细胞中含有1个MSC,并且在重大感染、骨髓恶性肿瘤或跟着年纪增加的情况下,骨髓MSCs数量及增殖、分化才能均明显降落。2004年,Fukuchi等从成熟胎盘小叶中获得MSCs,后来证明胎盘来源的MSCs(placentaderivedmesenchymalstemcells,PDMSCs)存在跟骨髓来源的MSCs类似的状况学、免疫表型跟功能特点。咱们实验室也证明PDMSCs存在向脂肪、软骨、骨跟神经分化的潜能。胎盘作为产后“放弃物”,对其研究不波及伦理道德问题,且来源丰富。目前国内外尚未见PDMSC(此处忽略..)s向血管内皮细胞分化。因此,本实验将体外分别培养获得的PDMSCs经VEGF跟bFGF体外引诱向血管内皮细胞分化,并在引诱过程中的不同时光点检测内皮特异性抗原的表白变更跟分化的ECs在体外形成血管的才能,为临床上利用PDMSCs移植医治缺血性疾病跟构建血管组织工程提供实验根据。方法1、PDMSCs的分别、纯化跟扩增采取组织块种植法提取原代,无菌前提下剪碎胎盘组织,而后均匀接种至10cm培养皿,加含10%FBS的DMEM1Oml,37℃、5%CO2及饱跟湿度前提下培养,每3d换液一次,待细胞爬出成长至培养皿底部面积的70%-80%时去组织块传代,传2-3代,红细胞、成纤维细胞等混淆细胞即消散。本实验选取第3代PDMSCs进行引诱分化及检测。2、流式细胞仪分析收集第3代PDMSCs,细胞计数后取各管为1×106细胞,滴加PE标记的鼠抗人单克隆抗体CD105、CD34跟FITC标记的CD166、CD31、CD4520ul,分辨设PE、FITC、空白对比组,4℃避光孵育30min,冰PBS洗涤1次,弃上清,参加200ulPBS吹打混匀细胞,流式细胞仪检测。3、体外ECs引诱分化培养抉择传代纯化后培养成长良好的第3代PDMSCs,调剂细胞浓度为3×104cells/ml跟1.5×1O5cells/ml分辨接种于35mm培养皿跟60mm培养皿中,加内皮细胞引诱分化培养基,置于37℃、5%CO2及饱跟湿度前提下培养,每4d换一次新鲜引诱液。4、光镜下察看PDMSCs状况变更在光学倒置显微镜下察看PDMSCs引诱后状况学变更、增殖情况及排列方法,对比0d、4d、8d、12d的变更。隔天察看一次。5、免疫细胞化学染色以3×104cells/ml密度接种于35mm培养皿中,加引诱分化培(文章此处忽略..)养基培养,分辨于分化第0d、4d、8d、12d用免疫细胞化学染色法检测内皮特异性标记CD31、CD144/VE-cadherin、KDR、vWF的蛋白表白情况。弃去培养基,PBS洗3遍4%多聚甲醛固定30min,滴加一抗,4℃孵育过夜,滴加二抗,37℃孵育30min。显微镜下察看拍照。6、透射电镜察看细胞超微构造引诱后的细胞用0.25%Trypsin-EDTA消化后,1%锇酸固定,O.lmol/LPBS漂洗三次,酒精、丙酮梯度脱水:30%酒精-50%酒精-70%酒精-80%丙酮-90%丙酮-100%丙酮。环氧树脂浸透、包埋,超薄切片70nm。JEM-1200EX镜下察看并拍照。7、体外血管生成实验用体外血管生成试剂盒,察看在半固体Matrix上引诱7d的细胞构成毛细血管样网状构造的才能。将Matrix置于4℃熔化,24孔板每孔铺200ulECMatrix,37℃、5%CO2的培养箱孵育2h,将引诱7d的PDMSCs以5×104/孔接种到半固体培养基上,2h后开端在倒置显微镜下察看细胞构成管状构造的状况。成果1、PDMSCs的原代培养成果胎盘组织块接种后,约7d-10d组织块四周可见梭形跟小圆形两种贴壁细胞。跟着细胞密度的增加,细胞逐步变成梭形单层细胞,呈漩涡状排列,胞体变得大而扁平,状况类似于成纤维细胞。约14d-21d,细胞成长至70%-80%去组织块传代培养,传代细胞牢固成长。2、流式细胞仪检测第3代PDMSCs高表白MSCs的名义标记CD105(92.87%)跟CD166(72.40%),不表白造血体系特异标记CD34跟白细胞独特抗原CD45,也不表白内皮细胞特异的名义标记CD31。3、细胞状况学跟排列方法察看在倒置跟相差显微镜下察看,引诱分化的细胞状况呈鹅卵石样,且细胞排列存在必定方向性,呈管腔状、轮辐状、条带状成长,且细(本文此处忽略..)胞呈首尾相接连接在一起。4、免疫细胞化学染色成果(1)CD31在ECs分化过程的表白变更在PDMSCs向ECs引诱分化的过程中,CD31在4d呈现微量表白,但与Od比拟无统计学意思(P>0.05),跟着细胞始终分化,于分化8dCD31表白明显加强,明显高于0d、4d、12d(P0.05),12d表白减弱。(2)VE-cadherin/CD144在ECs分化过程的表白变更在PDMSCs向ECs引诱分化的过程中,CD144呈时光依附性地表白于细胞与细胞之间的粘着小带,在引诱分化的Od跟4d有微量表白,二者比拟无统计学意思(P0.05),于分化8d跟12d,细胞与细胞之间CD144阳性染色的棕黄色颗粒呈现逐步增多的趋势。图像分析表明,PDMSCs向ECs引诱分化的8d跟12d,细胞的积分光密度值(IOD)与其余三组有明显的统计学差别(P0.05),表明CD144可作为内皮终末分化的标记来鉴定成熟阶段的内皮细胞。(3)vWF在ECs分化过程的表白变更在PDMSCs向ECs引诱分化的过程中,vWF在0d有微量表白,4d表白加强,8d达顶峰,之后牢固表白。图像分析表明,PDMSCs向ECs引诱分化的8d跟12d,细胞的积分光密度值明显高于Od跟4d(P0.05)。(4)Flk-1/KDR在ECs分化过程的表白变更Flk-1作为内皮细胞的早期标记,在Od即有表白,4d表白最强,随后表白降落。图像分析表明,PDMSCs向ECs引诱分化的4d,细胞的积分光密度值明显高于0d、8d跟12d(P0.05),0d、8d跟12d三组间无统计学意思(P0.05)。5、PDMSCs引诱的ECs超微构造透射电镜下察看引诱8d的细胞,可能看见内皮细胞典范的细胞膜穴样凹陷跟吞饮小泡,胞浆中可见内皮特异性构造Weibel-palade小体。此外,(略..)胞浆中可见较多线粒体、高尔基体、粗面内质网跟溶酶体等细胞器,提示细胞增殖分化茂盛,核膜跟核仁清楚可见。6、PDMSCs源的内皮细胞体外血管生成才能引诱7d的内皮细胞接种到细胞外基质凝胶(ECMatrigel)中,2h后相邻的细胞伸出触突彼此相连,并逐步通过管状构造联成网状,5h-6h趋于典范,呈“毛细血管腔”样构造,而未分化的PDMSCs呈散在的细胞,不能构成管样构造。论断1、胎盘组织中可能分别出大量的PDMSCs。2、PDMSCs在体外可被引诱分化为血管内皮细胞,且分化的内皮细胞在体外存在迁徙跟血管构成才能。3、在PDMSCs向ECs分化过程中,内皮特异性标记Flk-1/KDR、CD31、vWF跟VE-cadherin/CD144的表白顶峰呈必定时光次序性。


以上为本篇毕业论文范文人胎盘来源的间充质干细胞向血管内皮细胞分化潜能的研究的介绍部分。
本论文在医药医学论文栏目,由论文网(www.zjwd.net)整理,更多论文,请点论文范文查找

毕业论文降重
收费专业论文范文
收费专业论文
汉语言文学论文
物理学论文
自动化专业论文
测控技术专业论文
历史学专业论文
机械模具专业论文
金融专业论文
电子通信专业论文
材料科学专业论文
英语专业论文
会计专业论文
行政管理专业论文
财务管理专业论文
电子商务国贸专业
法律专业论文
教育技术学专业论文
物流专业论文
人力资源专业论文
生物工程专业论文
市场营销专业论文
土木工程专业论文
化学工程专业论文
文化产业管理论文
工商管理专业论文
护理专业论文
数学教育专业论文
数学与应用数学专业
心理学专业论文
信息管理专业论文
工程管理专业论文
工业工程专业论文
制药工程专业论文
电子机电信息论文
现代教育技术专业
新闻专业论文
热能与动力设计论文
教育管理专业论文
日语专业论文
德语专业论文
轻化工程专业论文
社会工作专业论文
乡镇企业管理
给水排水专业
服装设计专业论文
电视制片管理专业
旅游管理专业论文
物业管理专业论文
信息管理专业论文
包装工程专业论文
印刷工程专业论文
动画专业论文
营销专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文范文
法律专业论文范文
教育管理论文范文
小学教育论文范文
学前教育论文范文
财务会计论文范文

电子商务论文范文

上一篇:高速离心剪切粉碎对灵芝孢子粉破.. 下一篇:协同观下的贸易步行街核心节点空..

最新论文

精品推荐

毕业论文排版

热门论文


本站简介 | 联系方式 | 论文改重 | 免费获取 | 论文交换

本站部分论文来自网络,如发现侵犯了您的权益,请联系指出,本站及时确认删除 E-mail:229120615@qq.com

毕业论文范文-论文范文-论文同学网(www.zjwd.net)提供医药医学论文毕业论文,毕业论文范文,毕业设计,论文范文,毕业设计格式范文,论文格式范文

Copyright@ 2010-2024 zjwd.net 毕业论文范文-论文范文-论文同学网 版权所有