c-Ski、Smad3跟p15在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表白及意思

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c-Ski、Smad3跟p15在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表白及意思

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毕业论文范文题目：c-Ski、Smad3跟p15在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表白及意思，论文范文关键词：c-Ski、Smad3跟p15在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表白及意思
c-Ski、Smad3跟p15在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表白及意思毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标：大肠腺瘤是一种存在癌变潜能的良性病变，80%以上大肠癌由大肠腺瘤癌变发展而来，管状腺瘤是大肠腺瘤最常见的病理组织学类型,其癌变是由多因素、多基因综配合用的成果,癌变机制尚不明白。目前,TGF-β/SMAD信号通路在肿瘤产生发展中作用的研究成为医学界关注热点，TGF-β/SMAD信号通路参加细胞增殖、分化等生理过程，生物信号经TGF-β/SMAD族配体与细胞膜名义的受体结合，由Smads蛋白传递给目标基因,通路中某些因子异样,可促进肿瘤产生发展。c-Ski基因属原癌基因，重要通过与TGF-β/SMAD信号通路下游转录因子Smad3结合构成复合物，禁止Smads蛋白磷酸化，克制TGF-β/SMAD信号通路。研究发明c-Ski与人类多种肿瘤产生发展密切相干，有很多肿瘤细胞系如黑色素瘤、乳腺癌、前列腺、胰腺癌等，存在转录活性跟参加核转位的功能。Smads复合物可与目标基因结合调节下游相干因子转录，例如c-myc等。研究发明，在某些肿瘤中呈现Smad3高表白，如绒癌跟胶质母细胞瘤；在某些肿瘤中如肝癌、胃癌、跟皮肤鳞癌中Smad3表白量降落，而在结肠癌细胞系SNU-769A跟SNU-769B中呈现Smad3基因渐变。p15是一种抑癌基因，是TGF-β/SMAD信号通路下游的靶点，参加TGF-β/SMAD信号通路对细胞成长及增殖程序的调节，是细胞周期克制因子。研究发明很多肿瘤呈现p15基因产生缺失跟渐变，表白量降落，如膀胱移行细胞癌、食管癌、肝癌跟胃癌等。目前有关TGF-β/SMAD信号通路相干因子c-Ski、Smad3跟p15在披发性大肠腺瘤癌变中的意思研究国内外少见报道。本实验采取病理状况学察看结合免疫组织化学、Westernblot、Realtime-PCR以及细胞培养方法检测畸形大肠粘膜、伴有不同程度异型增生的披发性大肠管状腺瘤跟大肠腺瘤癌变组织中c-Ski、Smad3跟p15蛋白及mRNA的表白情况及与临床病理特点关联，并进一步分析三者相干性，探讨三者在披发性大肠肠管状腺瘤癌变过程中的意思，为大肠腺瘤癌变防备跟临床医治提供实际根据。方法：1免疫组织化学方法采取免疫组织化学E（文章此处忽略..）livisionTMplus两步法，研究20例畸形大肠粘膜、81例披发性大肠管状腺瘤伴上皮异型增生病例、32例大肠管状腺瘤癌变病例中c-Ski、Smad3跟p15蛋白表白情况。2蛋白免疫印记（Westernblot）用Westernblot方法检测18对新鲜大肠腺瘤癌变组织及相应畸形大肠粘膜以及HIEC跟HT-29中c-Ski、Smad3及p15的表白情况。匀浆方法提取组织总蛋白；预冷的细胞裂解液参加细胞中，提取细胞总蛋白；经12%SDS-PAGE电泳，电转移到PVDF膜上，10%脱脂牛奶封闭1.5小时。一抗（c-Ski1:800；Smad31:5000；p151:500；）4℃过夜，二抗（1:8000）于37℃孵育1.5h，ECL显色。Odyssey仪器进行显色分析,Bio-LD图像分析体系进行定量分析。3Realtime-PCR利用Realtime-PCR检测了18对新鲜大肠腺瘤癌变组织跟相应畸形大肠粘膜组织以及HIEC跟HT-29中c-Ski跟Smad3mRNA的表白情况,采取AppliedBiosystems公司提供的ComparativeCt(ΔΔCt)方法打算,打算目标基因的绝对表白量。4细胞培养体外培养人类畸形结肠粘膜上皮细胞株(HIEC)，用含10%的胎牛血清配以105U/L青霉素、100mg/L链霉素跟0.625%胰岛素的RPMI-1640培养基培养；人类结肠癌细胞株(HT-29)，用含10%的胎牛血清配以105U/L青霉素、100mg/L链霉素的RPMI-1640培养基培养。细胞呈贴壁成长，取对数成长期的培养细胞，用0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA消化，进行细胞传代以及细胞的收集，进行相干研究。5统计学分析利用SPSSStatistics17.0软件，计量材料以均数±标准差(x±s)表示，数据分析采取t测验、χ2测验、wilcoxon符号秩跟测验及spearman相干分析,P0.05时认为差别有统计学意思。成果：1c-Ski在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表白情况1.1c-Ski蛋白的表白情况1.1.1免疫组织化学成果c-Ski在畸形大肠粘膜、管状腺瘤伴不同程度异型增生组及管状腺瘤癌变组中的阳性表白率逐步升高，分辨是 %（2/20）、55.56%（45/81）、81.25%（26/32）其中管状腺瘤伴不同程度异型增生跟管状腺瘤癌变组中c-Ski的阳性表白率明显高于畸形大肠粘膜，差别有（本文此处忽略..）统计学意思（P0.05）。大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生组中c-Ski的阳性表白率逐步升高,分辨为28.13%（9/32）、60.00%（15/25）、87.50%（21/24）中、重度异型增生组c-Ski蛋白阳性表白率明显高于轻度异型增生组（P0.05）。1.1.2c-Ski蛋白的表白与临床病理特点关联c-Ski蛋白阳性表白率与大肠管状腺瘤大小有关，腺瘤直径≥2cm组c-Ski蛋白阳性表白率高于腺瘤直径＜2cm组，分辨为73.91%（34/46）跟55.22%(37/67)(P0.05)；而与患者性别、年纪跟腺瘤产生部位无关(P0.05)。1.1.3蛋白免疫印记（Westernblot）成果在18对新鲜大肠腺瘤癌变组织及相应畸形大肠粘膜中,以β-actin（43KD）为内参,披发性大肠管状腺瘤癌变组织内c-Ski(85KD)蛋白表白明显高于畸形粘膜组织，差别有统计学意思（P0.05）。1.2c-SkimRNA在披发性大肠管状腺瘤癌变组织与相应畸形大肠粘膜中的表白情况Real-timePCR检测成果表明，44.44%（8/18）病例中c-SkimRNA在肿瘤组织中的表白明显高于其匹配的畸形肠粘膜组织。进一步分析发明，c-SkimRNA在肿瘤组织的均匀表白量较畸形肠粘膜组织增加，有统计学意思（P0.05）。2Smad3在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表白情况2.1Smad3蛋白的表白情况2.1.1免疫组织化学成果Smad3在畸形大肠粘膜、管状腺瘤伴不同程度异型增生组及管状腺瘤癌变组中的阳性表白率分辨是60.00%（12/20）、54.32%（44/81）、84.38%（27/32）管状腺瘤癌变组中Smad3蛋白的阳性表白率高于管状腺瘤异型增生组跟畸形大肠粘膜，有统计学意思（P0.05）；管状腺瘤异型增生组中Smad3的阳性表白率稍低于畸形大肠粘膜，无统计学意思（P0.05）。大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生组中Smad3的阳性表白率分辨为50.00%（16/32）、44.00%（11/25）、70.83%（17/24）Smad3蛋白的阳性表白率在不同程度异型增生组之间无明显差别（P0.05）。2.1.2Smad3蛋白的表白与临床病理特点关联Smad3蛋白阳性表白率与患者性别、年纪、腺瘤产生部位跟腺瘤大小无关（P0.05）。2.1.3蛋白免疫印记（Westernblot）成果在18对新鲜大肠腺瘤癌变组织及相应畸形大肠粘膜中，以β-actin（43KD）为内参，披发性大肠管状腺瘤癌变（本文此处忽略..）组织内Smad3(58KD)蛋白表白明显高于畸形大肠粘膜组织，有统计学意思（P0.05）。2.2Smad3mRNA在披发性大肠管状腺瘤癌变组织与相应畸形大肠粘膜中的表白情况Real-timePCR检测成果表明，50.00%（9/18）病例中Smad3mRNA在肿瘤组织中的表白明显高于其匹配的畸形肠粘膜组织。进一步分析发明，Smad3mRNA在肿瘤组织的均匀表白量较畸形肠粘膜组织增加，有统计学意思（P0.05）。3p15在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中蛋白的表白情况3.1免疫组织化学成果p15在畸形大肠粘膜、管状腺瘤伴不同程度异型增生及管状腺瘤癌变组织中的阳性表白率逐步降落，分辨是85.00%（17/20）、56.80%（46/81）、31.25%（10/32）管状腺瘤伴不同程度异型增生跟管状腺瘤癌变组中p15的阳性表白率明显低于畸形大肠粘膜，有统计学意思（P0.05）。大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生组中p15的阳性表白率分辨为81.25%（26/32）、52.00%（13/25）、29.17%（7/24）中、重度异型增生组中p15的阳性表白率低于轻度异型增生组，有统计学意思（P0.05）,重度异型增生组p15的阳性表白率低于中度异型增生组,无统计学意思（P0.05）。3.2p15蛋白的表白与临床病理指标的特点关联p15蛋白阳性表白率与大肠管状腺瘤大小有关，腺瘤直径≥2cm组p15蛋白阳性表白率明显低于腺瘤直径＜2cm组，分辨为32.61%(15/46)跟61.19%(41/67)(P0.05)；而与患者性别、年纪跟腺瘤产生部位无关(P0.05)。3.3蛋白免疫印记（Westernblot）成果以β-actin（43KD）为内参，披发性大肠管状腺瘤癌变组织内p15(15KD)蛋白表白明显低于畸形大肠粘膜组织，有统计学意思（P0.05）。4c-Ski、Smad3跟p15蛋白表白在披发性大肠管状腺瘤癌变中的相干性分析相干分析成果显示在披发性大肠管状腺瘤组织中c-Ski跟Smad3之间呈正性相干（r=0.242,P0.05）,c-Ski跟p15蛋白表白呈负相干（r=-0.190,P0.05）,Smad3跟p15之间无明显相干性（r=-0.117,P0.05）。5结肠癌细胞株HT-29中c-Ski、Smad3跟p15的表白情况HT-29中c-Ski蛋白及mRNA表白明显高于HIEC，有统计学意思（P0.05）；Smad3蛋白及mRNA表白明显高于HIEC，有统计学意思（P0.05）；p15蛋白表白明显低于HIEC，有统计学意思（P0.（略..）05）。论断：1在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中，c-Ski蛋白阳性表白率逐步升高，p15蛋白阳性表白逐步降落，Smad3蛋白阳性表白率在大肠腺瘤癌变组高于畸形大肠黏膜跟大肠腺瘤组。提示TGF-β/SMAD信号通路相干因子c-Ski、Smad3跟p15在披发性大肠腺瘤癌变过程中可能发挥必定作用。2在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中c-Ski与Smad3与间存在正相干关联,提示在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中，两者可能存在协同作用；c-Ski跟p15间存在负相干关联,Smad3与p15间无明显相干性。3HT-29中c-Ski跟Smad3蛋白及mRNA的表白高于HIEC,p15蛋白表白低于HIEC，提示三者在大肠癌的产生可能发挥必定作用。

以上为本篇毕业论文范文c-Ski、Smad3跟p15在披发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表白及意思的介绍部分。

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