脑活素及法舒地尔引诱骨髓间充质干细胞增殖分化的研究

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脑活素及法舒地尔引诱骨髓间充质干细胞增殖分化的研究

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毕业论文范文题目：脑活素及法舒地尔引诱骨髓间充质干细胞增殖分化的研究，论文范文关键词：脑活素及法舒地尔引诱骨髓间充质干细胞增殖分化的研究
脑活素及法舒地尔引诱骨髓间充质干细胞增殖分化的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标：研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分别、培养跟扩增方法,使其保持干细胞特点--自我更新跟多向分化潜能；并探讨脑活素及法舒地尔体外引诱骨髓间充质干细胞增殖分化为神经元样细胞的可能性跟前提,为神经体系伤害跟神经退行性疾病的医治提供良好的实际基本跟实验根据。方法：本课题选取150g左右SD大鼠股骨跟胫骨骨髓做骨髓间充质干细胞的分别培养,采取全骨髓直接贴壁法获得原代大鼠骨髓BMSCs,差速贴壁结合消化把持法纯化细胞。MTT法检测BMSCs成长最佳血清浓度及成长曲线。流式细胞仪细胞检测BMSCs成长周期及名义抗原CD34、CD44、CD29、CD90、CD45跟CD31的表白。BMSCs经bFGF预引诱后,利用脑活素跟法舒地尔引诱骨髓间充质干细胞,并用倒置相差显微镜察看记录细胞的状况学变更；细（此处忽略..）胞免疫组织化学法检测引诱后各组细胞巢蛋白(Nestin)、神经丝蛋白(NF),神经元特异烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)等神经细胞特异性标记物的表白情况。成果：1.大鼠BMSCs的分别、培养跟鉴定(1)通过贴壁法能获得纯度较高的BMSCs,原代培养3天后细胞呈纺锤形。7天后细胞呈团簇、集落状成长。细胞传代3代后仍增殖茂盛呈梭形。(2)10%血清浓度为BMSCs成长最佳浓度。(3)从传代细胞成长曲线可见：第1-2天为细胞成长埋伏期,第3-4天为对数增加期,6天当前细胞的成长进入平台期,合乎干细胞的成长法则。(4)细胞周期分析显示：处于G0/G1期的细胞为93.99%,处于非增殖状况,S期的细胞为5.46%,G2/M0期的细胞为0.54%。G0/G1期占全部细胞群的比例达93.99%,同时也阐明了BMSCs的高分化潜能。(5)流式细胞仪检测细胞名义标记：表白CD90、CD（此处忽略..）29、CD44,不表白CD34、CD45、CD31。2.体外引诱BMSCs后的状况学变更(1)脑活素体外引诱BMSCs增殖分化以10ng/mlbFGF预引诱24小时后,细胞状况较预引诱前未产生改变。接着以脑活素引诱后,细胞成长状况较未参加脑活素前好,细胞数量增多,且存在统计学意思(P0.05),但细胞状况改变不明显,细胞紧缩,呈现三角形样细胞,但未见明显细胞崛起。(2)法舒地尔体外引诱BMSCs增殖分化法舒地尔引诱组引诱6小时后细胞状况逐步产生变更,呈现双极形、多极形跟锥形细胞,呈神经元样细胞。引诱24小时后,可见较多神经元样细胞,突触逐步构成并增多,细胞崛起彼此交错浮现网络状连接。引诱48小时后,细胞突触产生断裂溶解,网络状连接消散,细胞数量减少。3免疫组织化学染色成果对比组Nestin、NSE、NF、GFAP抗体均未见阳性（本文此处忽略..）染色。脑活素组中免疫组化可见少数Nestin、NSE、NF、GFAP染色阳性细胞,与空白对比组比拟,无明显性差别(P0.05)。法舒地尔引诱实验组：引诱6小时后Nestin、NSE、NF、GFAP抗体染色呈阳性反应,与脑活素组及空白对比组比拟,有明显性差别(P0.05)。引诱24小时后Nestin、NF、GFAP抗体染色阳性率高于6小时,有明显性差别(P0.05)；NSE阳性率低于6小时,无明显性差别(P0.05)。引诱48小时后,Nestin、NF、GFAP阳性率高于24小时,有明显性差别(P0.05)；NSE阳性率低于24小时,无明显性差别(P0.05)。Nestin、NF与GFAP:随引诱时光延长阳性率逐步增高,各组差别均有明显性(P0.01)。NSE：阳性细胞率6小时48小时24小时,差别无明显性(P0.05)。论断：通过贴壁筛选法体外分别、培养,传代后可获得纯度较（文章此处忽略..）高的骨髓间充质干细胞。脑活素引诱BMSCs后细胞状况改变不明显,胞体紧缩,呈现三角形样细胞,但未见明显细胞崛起；法舒地尔在体外可引诱BMSCs分化为神经元样细胞,免疫组化显示引诱细胞表白Nestin、NSE、NF、GFAP等神经细胞特异性标记物。为进一步研究BMSCs利用于神经体系伤害跟神经退行性疾病的细胞医治提供了良好的实验基本。

以上为本篇毕业论文范文脑活素及法舒地尔引诱骨髓间充质干细胞增殖分化的研究的介绍部分。

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