大蒜素结合奥沙利铂对HCT-8细胞成长的影响及机制探讨

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大蒜素结合奥沙利铂对HCT-8细胞成长的影响及机制探讨

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毕业论文范文题目：大蒜素结合奥沙利铂对HCT-8细胞成长的影响及机制探讨，论文范文关键词：大蒜素结合奥沙利铂对HCT-8细胞成长的影响及机制探讨
大蒜素结合奥沙利铂对HCT-8细胞成长的影响及机制探讨毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景与目标:跟着人们生活方法跟膳食构造的改变以及人口的老龄化,大肠癌的发病率有逐年回升的趋势。目前大肠癌占恶性肿瘤的10%～15%,且寰球大肠癌发病率仍以2%的速度递增。在我国,近年来大肠癌发病率增加较快,尤以大城市明显。据统计,大于30%的病人在临床诊断时已属转移性大肠癌。手术病例中早期大肠癌不足5%,大肠癌根治术后50%以上的病人在5年内复发。对复发或转移性大肠癌,化疗在其综合医治中应占重要地位。奥沙利铂是大肠癌术后帮助化疗及部分晚期大肠癌姑息化疗的一线药物。然而奥沙利铂凸起的累积剂量相干的毒副反应如慢性四周神经毒性限度了其临床长期利用。所以须要寻找一种能加强奥沙利铂抗肿瘤作用而本身无明显毒副作用的药物。大蒜素是从大蒜球茎提取出来的一种含硫化合物,化大名为二烯丙基三硫化物(DiallylTrisulfide,DATS),被誉为天然广谱抗生素药物。除抗炎作用外,大蒜素还存在抗衰老、降血脂、降血压、抗凝血、抗病毒等作用。近年研究发明大蒜素对肿瘤细胞存在克制细胞成长、调节细胞周期、促进细胞凋亡及直接杀伤肿瘤细胞等作用。研究还表明大蒜素不仅可能通过（本文此处忽略..）调节机体免疫功能以烦扰肿瘤的成长以还可能与化疗药物合用起到化疗增敏作用。国内外有大蒜素结合紫杉醇、长春新碱或顺铂作用于宫颈癌、前列腺癌、食管癌及胃癌等细胞的报道,但大蒜素与奥沙利铂联配合用于大肠癌的报道鲜见。为研究大蒜素与奥沙利铂单独及结合利用对大肠癌HCT-8细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响并初步探讨其机制,本实验把大蒜素跟奥沙利铂单独及联配合用于HCT-8细胞,通过MTT法及流式细胞术检测了两药单用及结合利用对HCT-8细胞的决裂增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响,进一步通过免疫细胞化学方法从蛋白分子程度检测细胞凋亡情况。这为临床结合利用大蒜素与奥沙利铂以减少奥沙利铂的利用剂量并进而减少其累积剂量相干性毒副反应的产生率、进步肿瘤细胞对奥沙利铂的敏感性提供了实验根据。材料与方法:1.细胞复苏与培养。惯例复苏冻存的HCT-8细胞,培养在含有10%标准胎牛血清的RPMI-1640培养液中,于37℃、5%CO_2饱跟湿度培养箱内。每2-3天消化传代。2.MTT法检测不同浓度的大蒜素、奥沙利铂对HCT-8细胞24、48、72h的增殖克制率(IR)、并打算各药物对HCT-8细胞24h（此处忽略..）的半数克制浓度IC_(50)。药物对细胞的成长克制率:IR(%)=(1-实验组均匀OD值/对比组均匀OD值)×100%。3.MTT法检测大蒜素结合奥沙利铂对HCT-8细胞的增殖克制造用。分组为大蒜素组、奥沙利铂组、结合用药组、对比组跟调零组,作用时光为24h。4.倒置显微镜下察看药物作用前及作用24、48、72h后细胞状况的变更。5.流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡。HCT-8细胞用无血清培养基培养24h,使细胞成长同步化,之后惯例培养。细胞贴满瓶底70%时候组:大蒜素组、奥沙利铂组、结合用药组跟对比组。处理因素作用24h后终止。各组细胞收集后取一部分及时上机检测细胞凋亡,另一部分经冰乙醇固定过夜后上机检测细胞周期。6.免疫组化法检测caspase-3的表白。取对数生期的HCT-8细胞,参加已放置盖玻片的24孔板中,细胞贴满瓶底70%时候组处理。分组处理及作用时光同凋亡检测。采取免疫细胞化学SP法DAB检测体系检测caspase-3的表白。成果断定:caspase-3阳性细胞胞浆/胞核呈现棕黄色颗粒,以胞浆为主。成果:1.大蒜素跟奥沙利铂单独作用于HCT-8细胞后,与对比组比较,增殖克制率均升高(均（略..）为P＜0.01),并且大蒜素跟奥沙利铂对HCT-8细胞的增殖克制造用随药物浓度的增加及作用时光的延长而增加。2.大蒜素跟奥沙利铂对细胞成长的协同克制效应。结合用药组的细胞成长克制率较各单药组明显增加,差别均存在统计学意思(均为P＜0.01),两药合用表示为协同作用:q=1.27,P＜0.05。3.对比组细胞成长状况良好,呈不规矩多角形,随时光推移,细胞数量渐增多。大蒜素组跟奥沙利铂组细胞,随药物作用时光的延长,细胞数量逐步减少,体积缩小,外形变圆,部分胞浆内呈现空泡,可见有悬浮细胞。结合用药组,上述变更更明显,悬浮细胞明显增多。4大蒜素跟奥沙利铂对细胞周期的影响。大蒜素引诱HCT-8细胞24h后,细胞周期产生了明显变更。跟对比组比较,大蒜素组跟结合用药组的G_0/G_1期细胞减少,G_2/M期细胞增加(均为P＜0.01),而S期细胞无明显变更(均为P＞0.05);奥沙利铂组各周期与对比组比较无明显变更(均为P＞0.05)。5.大蒜素跟奥沙利铂对细胞凋亡的影响。药物作用24h后,与对比组比较,大蒜素组、奥沙利铂组及结合用药组的凋亡率均增加(P＜0.01);与奥沙利铂组、大蒜素组分辨比较,结合用药组细胞凋（文章此处忽略..）亡率明显增高(均为P＜0.01)。6.caspase-3的阳性表白率。处理因素作用24h后,与对比组比较,大蒜素跟奥沙利铂各单药组及结合用药组caspase-3阳性表白率均增加(P＜0.01);与各单药组比较,结合用药组caspase-3阳性表白率均增加(P＜0.01)。论断:1.大蒜素对大肠癌细胞系HCT-8细胞存在增殖克制造用。2.大蒜素跟奥沙利铂结合利用对HCT-8细胞的增殖克制造用明显加强,两药合用表示为协同作用。3.大蒜素能促进HCT-8细胞的凋亡。大蒜素跟奥沙利铂联配合用细胞后,凋亡率明显升高。4大蒜素可将HCT-8细胞阻滞于G_2/M期。5.大蒜素可能与奥沙利铂结合利用,可能减少奥沙利铂利用剂量。

以上为本篇毕业论文范文大蒜素结合奥沙利铂对HCT-8细胞成长的影响及机制探讨的介绍部分。

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