孕期跟哺乳期TCDD处理对子鼠睾丸发育跟颌下腺EGF、EGFR表白的影

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孕期跟哺乳期TCDD处理对子鼠睾丸发育跟颌下腺EGF、EGFR表白的影

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孕期跟哺乳期TCDD处理对子鼠睾丸发育跟颌下腺EGF、EGFR表白的影毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：前言近年来，生物界产生的生殖异变、人类生殖体系肿瘤发病率的升高趋势引起人们的广泛关注。很多研究提示这些景象与环境传染有关。一些化学传染物在生物体内存在激素样或抗激素样作用，从而烦扰机体的内分泌均衡。因此，这类环境传染物又称为“环境类激素传染物”(EnvironmentalHormonePollutions)或“内分泌烦扰物质”(EndocrineDisruptors)。在1997年WHO报告的76种存在环境类激素作用的化学物质中，二噁英、多氯联苯、DDT等最具代表性。在天然界存在的200多种二噁英同类物中，以2，3，7，8位-氯代氢的二噁英(2，3，7，8-tetrachlorodibenzo-p-dioxinTCDD)毒性最大，是二噁英毒性研究中最具代表性的物质。TCDD的重要传染来源是垃圾焚烧、汽车尾气排放、除草剂出产及纸浆氯化漂白等出产过程，其重要通过食品、水、泥土、尘埃、空气进入人体，存在致癌及环境类激素作用。近年来，有关TCD（略..）D的生殖毒性跟其它内分泌烦扰作用已成为人类健康研究的热点。目前对于TCDD的生殖毒性研究多集中在雄性生殖体系。国外动物实验报道，孕期跟哺乳期TCDD处理可对雄性生殖体系发育产生必定生殖毒性，包含导致尿道下裂，前列腺、附睾分量降落，日精子产量降落等。但因为TCDD的剂量、处理机会及实验物种间的差别，很多实验成果尚有争议。目前对于孕期TCDD处理是否影响子鼠血清睾酮程度的统计学意思至今仍未树破，因此这是本实验的目标之一。EGF是一种有力的有丝决裂原，通过与其受体EGFR的结合，促进细胞增殖，调节组织分化跟器官产生。近年研究报道，EGF对雄性生殖体系的发育跟功能有重要的调节作用。TCDD的激素样烦扰作用是否影响了颌下腺跟睾丸组织内EGF，EGFR的表白及其意思如何？目前有关研究报道尚少，因此这也是本实验须要探讨的问题。本实验在个体器官发育的关键时代（孕期第15天）给予孕鼠TCDD处理一次，采取喷射免疫（文章此处忽略..）测定方法跟免疫组织化学方法，测定不同发育阶段的雄性子鼠血清寒酮程度跟察看TCDD处理对睾丸AR上GF表白，颌下腺EGF上CFR表白的影响，以期揭示孕期TCDD裸露是否对子代有确切的生殖毒性作用，及对EGF－EGFR道路有何影响，盼望为干涉办法的制订提供新的实验根据跟思路。实验材料1．实验动物4月龄健康SPragUe－Dawle大鼠，由中国医科大学实验动物部提供。2．重要试剂TCDD（2，3，7，8－tetrachlorodibem。－p－dloxln）；市售精制玉米油；寒酮放免分析试剂盒；SABC免疫组化试剂盒；兔抗大鼠表皮成长因子问GF）跟表皮成长因子受体瞩GFR）的多克隆抗体；小鼠抗大鼠雄激素受体（AR）的单克隆抗体。3．重要仪器高速冷冻离神思（微量入林玛计数仪；图象分析仪；石蜡切片机；·2·实验方法1．动物模型树破SD大鼠，雌雄随机交配。次日晨雌鼠阴道发明阴道栓为妊娠第0天。于孕15日晨灌胃一次。实验组：sug（文章此处忽略..）TCDD八g，灌胃量Zndkg，溶剂为玉米油／丙酮”5／5，v／V人对比组以溶剂灌胃。分娩不足8只子鼠的孕鼠被淘汰。于PNDI同组调剂每窝8只子鼠，雌雄配比为4：4。PND21天断奶，淘汰雌鼠。分辨于PNDZI，PND32，PNm9，PND63每窝取一只雄子鼠进行取材。2．标本制备断头取血，血液低温离心，收集血清，－70℃保存，用于放免测定。雄子鼠腹腔麻醉，经左心室4％多聚甲醛灌流固定，取颌下腺跟左侧睾丸，寒丸矢状正中剖开，于同样固定液后固定，惯例脱水、透明、石蜡包埋。5卜m厚切片，用于免疫组织化学染色。睾丸切面向下包埋，5卜m切片，隔6张切片取一张做免疫组化。3．喷射免疫分析待测血清均衡至室温；加样：顺次加人‘内标记的睾酮、抗睾酮抗体；37℃温育二小时；4℃放置1小时为人分别剂后离心；吸弃上清；测各管积淀喷射性计数率。4．免疫组织化学石蜡切片标本，脱蜡水化；3％的H尸DRT（室温）6分钟；畸形羊血清，RT40分钟；加一抗RT孵育1小时，湿盒4℃过夜。次（本文此处忽略..）日晨加二抗，RTho分钟；加三抗KP复合物人RT60分钟；期间均用0．01MPBS洗5’X4次；DAB显色7—15分钟，用蒸馏水终止反应。苏木素复染。惯例脱水，透明，封片。对比实验：用PBS代替第一抗体染色成果为阴性。5．免疫反应产物的定量分析·3·用CoolsPaPfa瞩OPER日本）图象分析仪分析对比组跟TCDD实验组大鼠睾丸AR上GR免疫产物的绝对含量；颌下腺EGF跟EGFR免疫产物的绝对含量。6．统计学处理采取SAS统计软件分析数据。全部实验数据以均数上标准差k加）表示，两均数间比较用t测验。实验成果二．TCDD对大鼠体重及睾丸分量的影响TCDD实验组大鼠的体重增加跟睾丸分量均低于畸形对比组。但只有在PND21有统计学意思h＜0．01人2．

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