系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞TLR9基因启动子区域甲基化状态研究

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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞TLR9基因启动子区域甲基化状态研究

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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞TLR9基因启动子区域甲基化状态研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景：系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,SLE)是一种累及全身多系统的慢性进行性自身免疫性疾病,其免疫学特征为自身抗体产生、补体激活和免疫复合物形成,从而导致多器官组织的炎症损伤。迄今为止SLE发病机制尚未阐明,目前认为与环境因素、性别、遗传及免疫学异常密切相关。近期表观遗传学研究表明：DNA甲基化可以帮助阐明自身免疫性疾病特别是SLE的发病机制。环境等因素导致的DNA甲基化状况改变,特别是低甲基化引起异常基因表达而导致免疫紊乱,使具有遗传倾向的个体发生自身免疫反应,导致SLE发生、发展。Toll样受体9(Toll-likereceptor9,TLR9)是Toll样受体家族中的一员,通过识别保守的病原体相关的分子位点(pathogen-associatedmolecularpatterns,PAMPs),参与特异性免疫应答,在天然免疫和特异性免疫之间架起桥梁。TLR（本文此处忽略..）9通过特异性识别CpG基序,启动激活髓样分化蛋白88(Myeloiddifferentiationprotein88,MyD88)依赖的信号转导通路,最终激活核因子NF-κB,导致一系列促炎症因子基因的表达并活化免疫细胞,导致B细胞的异常存活、分化和增殖及抗体产生,并导致浆细胞样树突状细胞(plasmacytoiddendriticcell,pDC)异常活化,释放大量的干扰素α(IFN-α),在自身免疫反应和炎症过程中发挥重要作用。诸多研究表明CpG基序通过TLR9介导的炎症反应在SLE发病中起着重要作用。本实验拟从一个全新角度探讨TLR9基因在SLE发病中的作用机制,以研究TLR9基因启动子区域甲基化状态与SLE相关性。目的：探讨TLR9基因启动子区域甲基化状态与SLE相关性。方法：1、病例的选择和标本的收集：参照1982年美国风湿协会(ACR)修订的SLE诊断标准,随机选择2011年8月至2012年2月间初次确诊未经治疗的云南SLE患者15例；正常对（略..）照32例,均为门诊体检正常人群,与患者无亲缘关系；2、提取外周血单个核细胞DNA、RNA;3、重亚硫酸盐测序法(BisulfitesequencingPCR,BSP)定量检测TLR9基因启动子区域CpG位点甲基化状态；4、实时荧光定量法(real-timefluorescentquantitativepolymerasechaieaction,RT-PCR)检测TLR9mRNA基因表达。5、利用SPSS11.5软件对数据资料进行统计分析。结果：1、SLE患者和健康对照TLR9基因启动子区域10个CpG位点甲基化率和其总体甲基化率相比较,两者差异无统计学意义(p0,05)；2、SLE患者和健康对照TLR9基因启动子区域10个CpG位点总体甲基化率相比较,两者差异无统计学意义(p=0.0970.05)；3、SLE患者TLR9基因启动子区域10个CpG位点总体甲基化率与患者年龄无相关性(r=0.369,p=0.1750.05)；4、健康对照组TLR9基因启动子区域10个CpG位点总体甲基化率与对照组年龄（本文此处忽略..）无相关性(r=0.263,p=0.1460.05)；5、SLE患者TLR9基因启动子区域10个CpG位点总体甲基化率与TLR9mRNA表达水平无相关性(r=0.097,p=0.7300.05)；6、SLE组TLR9mRNA表达水平(167.685±63.895)显著高于健康对照组TLR9mRNA表达水平(2.816±1.723),两者差异有统计学意义(p=9.379×10-80.05)；7、SLE活动期患者TLR9mRNA表达水平(207.370±25.227)显著高于缓解期SLE患者TLR9mRNA表达水平(88.316±32.334),差异有统计学意义(p=2.664×10-60.05)；SLE活动期患者TLR9mRNA表达水平显著高于健康对照组(2.816±1.723),差异有统计学意义(p=9.674×10-100.05)；SLE缓解期患者TLR9mRNA表达水平显著高于健康对照组,差异有统计学意义(p=0.0040.05);8、SLE患者TLR9mRNA表达水平与SLEDAI评分(systemiclupuserythematosusdiseaseactivityindex,SLE活动性评分)呈显著正直线相关(r=0.924,p=9.018×10-70.05)。结论：1、云南地区初发未治SLE患者（文章此处忽略..）外周血单个核细胞TLR9基因启动子区域甲基化程度无异常改变,对SLE发病可能没有贡献。2、云南地区初发未治SLE患者外周血单个核细胞TLR9mRNA的表达可做为判断SLE病情活动度的参考指标之一。3、TLR9mRNA的高表达可能参与了SLE发病机制。

以上为本篇毕业论文范文系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞TLR9基因启动子区域甲基化状态研究的介绍部分。

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