霍乱弧菌群体感应调控因子VqmA活性相关基因的筛选及LysR和MFS蛋白功能的研究

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霍乱弧菌群体感应调控因子VqmA活性相关基因的筛选及LysR和MFS蛋白功能的研究

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霍乱弧菌群体感应调控因子VqmA活性相关基因的筛选及LysR和MFS蛋白功能的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：霍乱弧菌(V.cholerae)是一种革兰氏阴性、兼性厌氧小杆菌,是引起人类腹泻疾病霍乱的病原体。大量研究证明,霍乱弧菌的致病能力主要是由霍乱毒素(choleraetoxin,CT)和毒素共调节菌毛(toxin-coregulatedpilus,TCP)引起的。霍乱弧菌毒力基因的表达受到各种环境条件的影响,如营养物浓度和种类、温度、pH、胆汁盐和群体感应信号分子。HapR是霍乱弧菌群体感应调控系统的关键调控因子,可以抑制霍乱弧菌（此处忽略..）CT和TCP表达。LuxR家族蛋白VqmA可以在低细胞浓度时诱导HapR的表达从而降低细菌的致病性。本文通过构建转座子随机突变文库的方法筛选影响VqmA活性的基因,获得七株候选的突变株,并且对突变株M1(△VC0073,SAM-依赖的甲基转移酶)做了深入的研究。研究发现该基因缺失后,VqmA无法激活报告基因的表达,并且VqmA的转录调控活性随着该基因的回复表达而恢复,VC0073是VqmA发挥活性的必须基因。VC0073编码合成的蛋白与SAM-依（略..）赖的甲基转移酶的同源性最高,在很多细菌中该酶参与一些小分子化合物的合成,VqmA激活目的基因的过程可能需要该酶合成的某类化合物的协助,但是研究发现该化合物并不存在于细菌上清液中。LysR类蛋白是一种全局性的转录调控因子,霍乱弧菌中约有40个LysR类型的蛋白。借助生物信息学工具,在霍乱弧菌中发现了五类比较特殊的LysR蛋白,这些蛋白的下游都为MFS家族蛋白。MFS家族蛋白属于多重药物转运蛋白。我们选取其中一组基因VC1617(En（略..）codingLysRProtein)和VC1618(EncodingMultidrugResistanceprotein)作为研究对象,研究发现VC1617缺失和过表达后霍乱弧菌可以在LB和M9培养基正常生长,VC1617并不是细菌在这两中培养基生长的必需基因,这在一定程度上也反映出了LysR蛋白生理功能的多样性。通过构建Luminescence检测质粒发现LysR不但可以抑制自身的表达而且还可以激活下游基因VC1618(MultidrugResistanc（本文此处忽略..）eGene)的表达。Westernblot试验表明VC1617缺失后霍乱弧菌毒力基因的表达并没有受到影响；虽然VC1617缺失后多重药物转运蛋白VC1618的表达量大为降低,但是突变株对一些特定药物的耐受能力并没有削弱；在毒力基因的表达量和药物的耐受能力都没有降低的情况下,突变株在小鼠体内的定殖能力也没有降低。

以上为本篇毕业论文范文霍乱弧菌群体感应调控因子VqmA活性相关基因的筛选及LysR和MFS蛋白功能的研究的介绍部分。

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