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黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC测定方法概述(二)
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黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC测定方法概述(二)
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黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC测定方法概述(二)
黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC测定方法概述(二)毕业论文范文介绍开始:
1.抗菌作用:黄连具有光谱抗菌作用,比如小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀等,这四种黄连生物碱都具有抗菌活性成分,抗菌谱也相同,而且都对耐药金葡菌的耐药性具有消除作用。
2.抗病毒作用:黄连对很多病毒均有抑制作用,比如流感病毒、柯萨奇病毒、风疹病毒等。另外,国外研究人员研究证明黄连素是具有抗HIV活性的有效成分,可用于治疗艾滋病。
3.对心血管的作用:黄连对心血管的作用很广泛,主要表现在抗心力衰竭、抗心率失常、治疗心肌炎等。其中,盐酸小檗碱对快速型室性心律失常具有良好的对抗作用。
4.降血压作用:在1969年就报道了黄连生物碱有降血压的作用
5. 抗炎作用:黄连素在黄连中的含量是最高的,也称为小檗碱,临床前动物实验研究表明黄连素具有明显的消炎作用。
6. 抗肿瘤作用:2015年的MTT法和抑菌圈实验研究黄连总生物碱对HepG2肿瘤细胞及大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑制性,结果表明,黄连总生物碱具有较强的抑制HepG2肿瘤细胞及细菌生长的特性。
7. 其他作用:黄连解毒汤对乙醇、阿司匹林诱发的胃电位差低下有明显的的抑制作用,表明黄连有保护胃粘膜的作用。研究表明黄连对吗啡依赖戒断综合征有较好的治疗作用。
黄连本身有较丰富的生物碱成分,具有多种药理活性,因此,其中较好的抗肿瘤作用等药效不断地受到人们的重视。
三、黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC测定方法
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。 接下来介绍黄连及其制剂中生物碱类化合物的HPLC测定方法:
(一)HPLC测定黄连小檗碱含量
这里介绍的是2003年尹清制药工程师HPLC测定黄连中盐酸小檗碱含量方法,它采用了耐酸性的ZOBAX Eclpse XDB-C6柱及PH值较低的流动相测定黄连中小檗碱的含量。该方法操作简便快速,结果准确稳定,重现低。
该实验结果显示:
1.实验过程中,曾摸索过4种流动相系统。其中反相系统:乙腈-0.05mol磷酸二氢钠(磷酸调PH2.5)(30:70)各峰完全分离,重现性好,方法稳定。
2.ZOBAX Eclpse XDB-C6柱耐酸性强,因为实验中将ZOBAX Eclpse XDB-C6柱与ZOBAX ODS XDB-C18柱进行过比较,发现了前者的耐酸性强,分离度好,重现性佳,适合酸性流动相。
3.流动相乙腈-0.05mol磷酸二氢钠(磷酸调PH2.5)(30:70),也就是这个反相系统更适合制药厂的原药材以及饮片的含量检测。
4.假如调节流动相比例乙腈-0.05mol磷酸二氢钠(磷酸调PH2.5)(25:75),以盐酸小檗碱峰计算,则出峰理论板数为9000以上,出峰时间7.5min。
(二)HPLC法测定黄连药材及其炮制品中主要生物碱的含量
这里介绍的是2010年阳勇研究员等人用HPLC法测定黄连药材及其炮制品中盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量。它采用了黄连药材的加工品以及有黄连饮片、酒黄连、姜黄连、萸黄连的炮制品,在其参考文献的基础上,采用液相色谱法,对不同来源、批次的黄连药材加工品以及炮制品进行了含量测定。
该实验结果显示:
1.黄连及其炮制品中生物碱类化学成分复杂,根据研究中不同的制备方法,确定研究中样品处理条件及色谱条件。证明简便易行、准确灵敏,重复性好,使用范围广,可用于检验、评价黄连、黄连炮制品及其相关产品。
2.研究中表明雅连和云连中生物碱成分的含量与味连相比存在较大差异,特别是其中的盐酸小檗碱及盐酸巴马汀含量相当低,故它们只能参考对照。
3.根据本实验对黄连药材及其各种炮制品的含量测定结果可知,黄连药材及黄连饮片、酒黄连、姜黄连、萸黄连中4 种生物碱的含量高低顺序均为:盐酸小檗碱> 盐酸黄连碱> 盐酸巴马汀> 盐酸表小檗碱;炮制品中,盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的平均含量高低次序均为:萸黄连> 姜黄连> 酒黄连。
4.不同炮制品中巴马汀、小檗碱、表小檗碱、黄连碱4 种生物碱具有相近的含量。
5.研究中结果表明了除盐酸小檗碱外,其他几种生物碱的含量也较高。
(三)HPLC法测定黄连上清片中盐酸小檗碱的含量
制剂,药物制剂,简称为制剂(Preparations):
为适应治疗或预防的需要,按照一定的剂型要求所制成的,可以最终提供给用药对象使用的药品。在这里介绍的是黄连上清片,中成药名。是由黄连、黄柏等17味中药组成的复方制剂,为清热剂,具有清热通便,散风止痛之功效。主治上焦内热,症见头晕脑胀,牙龈肿痛,口舌生疮,咽喉红肿,耳痛耳鸣,暴发火眼,大便干燥,小便黄赤。
同样也在这里介绍2005年汪寒林采用HPLC法测定黄连上清片中盐酸小檗碱的含量,此方法不但能更好地控制黄连上清片的质量,且操作简单,重复性、回收率和精密度均较好。
该实验结果显示:因为处方中黄柏、黄连中盐酸小檗碱是其主要有效成分。现行的质量标准中没有盐酸小檗碱含量测定方法,故探索以高效液相法(HPLC)测定黄连上清片中盐酸小檗碱的含量并做系统的方法学研究论证。通过研究中的色谱进样精密度实验,样品测定,重复性实验,稳定性实验,加样回收试验,空白对照试验等,证明该法的系统误差小、测定快捷、准确、可靠,能更好地控制黄连上清片的质量。
参考文献
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