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山楂中黄酮类化合物的测定方法概述 (2)(一)
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山楂中黄酮类化合物的测定方法概述 (2)(一)
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山楂中黄酮类化合物的测定方法概述
目 录
1、黄酮类化合物的测定对于中药材山楂应用与意义
2
2、 黄酮类化合物的各测定方法的阐述及其特点
2
2.1 紫外分光光度法[5] [6] [7]
2
2.1. 1 直接测定法
2
2.1. 2 差示分光光度法
3
2.1. 3 双波长和导数分光光度法
3
2.2 比色法[7] [8]
3
2.3 高效液相色谱法[1] [7]
4
2.4 其它测定方法[3]
4
2.4.1 薄层扫描法
4
2.4.3超临界流体色谱法
4
2.4.4毛细管电泳法
4
3、 山楂中黄酮类化合物的测定实例
5
4、 参考文献
6
1、黄酮类化合物的测定对于中药材山楂应用与意义
山楂为蔷薇科植物山里红Crataegus pin,natiida Bge.var.majorN.E.Br.或山楂Crataegus pin.nati fida Bge.的干燥成熟果实。山楂属于药食同源,具有很高的食用、 药用价值。主要功效有消食健胃,行气散瘀,化浊降脂。用于肉食积滞,胃脘胀满,泻痢腹痛,瘀血经闭,产后瘀阻,心腹刺痛,胸痹心痛,疝气疼痛,高脂血症等。近年来的临床和实验研究认为,山楂有降压 、降血脂 、舒张血管 、抗心率失常、抗氧化等作用。其中,黄酮类化合物是其最主要的有效成分。[ [1] 黄优生. 山楂总黄酮的测定.《南昌大学学报》, 2006.10 30(5):473-477
][1]
随着人们对山楂营养保健以及药用价值的认识, 以山楂为主的食品药品必将会得到迅速发展。为评价山楂及其制品的保健和药用价值,改善提取工艺和选择优质原料, 测定其中的有效成分黄酮类化合物是十分必要的。目前,植物提取物黄酮类化合物的测定一般采用比色法 、紫外法和高效液相色谱(HPLC)法等。本文通过对近年来黄酮类化合物的各个常用测定的方法的阐述, 为评价原药材及其制品的优劣以及对其研究、开发及应用提供借鉴。
2、 黄酮类化合物的各测定方法的阐述及其特点
2.1 紫外分光光度法[ [2] 付 晓 . 广西不同产地广山楂中总黄酮含量测定. 《亚太传统医药》, 2009.6 11( 3):33-35
[3] 林维宣. 紫外分光光度法测定山碴中总黄酮的研究.《大连轻工业学院学报》, 1993.6 12(2):42-50
[4] 李凤林. 天然黄酮类化合物含量测定方法研究进展.《江苏调味副食品》, 2008 25(4):8-13
][2] [3] [4]
紫外分光光度法具有重复性好、准确、简便、易掌握和不需要复杂的仪器设备等优点, 加之所需试剂便宜易得, 因此, 该方法应用于测定植物中黄酮含量最为广泛。
2.1. 1 直接测定法
大多数黄酮类化合物分子中存在桂皮酰基和苯甲酰基组成的交叉共轭体系, 其MeOH 谱 200~400 nm的区域内存在两个紫外吸收带, 峰带 Ñ( 300~ 400 nm )和峰带 ò ( 220~ 280 nm )。在黄酮的紫外吸收峰中, 峰带 ò的吸收峰较强, 是定量分析的重要依据。运用 lambert- Beer定律的数学运算, 紫外分光光度法可测定出样品中黄酮类化合物的含量。这种方法是依据黄酮自身结构的特点, 不使用显色剂, 直接在其特征吸收峰处对供试样进行测定。
山楂中的黄酮主要是牡荆碱鼠李糖试、单乙酸牡荆碱鼠李糖试和金丝桃戒.其分子式结构中,黄酮母核上所含的游离经基能与铝盐形成络合物此络合物在紫外区内有特征吸收峰, 可用于测定黄酮含量。
2.1. 2 差示分光光度法
差示分光光度法简称 ΔA 法, 使用稍高于样品或稍低于样品的标准作参比, 测量样品和参比间的相对吸光度. 而此相对吸光度又与样品和参比间的浓度差成比例关系, 借差示工作曲线而求出样品的含量。在黄酮类化合物测定中, 由于叶类植物中含有大量的叶绿素干扰测定, 虽然用石油醚处理样品可除去大量叶绿素, 但由于植物成分的复杂性, 在黄酮类成分主要吸收范围内仍可能有其它成分产生吸收而干扰测定。差示分光光度法利用样品溶液中黄酮类成分与 A lC l3 络合后, 在特征吸收波长处吸光度值发生显著变化, 所测得的络合前后的吸光度差值与样品中黄酮类成分在一定浓度范围内呈线性关系, 而样品中共存的其它组分 (如叶绿素 )由于在此波长下不发生吸收性质改变, 因而对测定无影响, 可较好地解决背景吸收的问题。且实验表明, 采用差示分光光度法测定, 当叶绿素含量较低时, 甚至可省略除叶绿素这一步骤, 因而使测定方法更加简便。
2.1. 3 双波长和导数分光光度法
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