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山楂中黄酮类化合物的测定方法概述 (3)(二)
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山楂中黄酮类化合物的测定方法概述 (3)(二)
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山楂中黄酮类化合物的测定方法概述 (3)(二)
山楂中黄酮类化合物的测定方法概述 (3)(二)毕业论文范文介绍开始:
山楂中黄酮类化合物的测定方法概述
图1-1 芦丁标准曲线
3.提取率的计算
山楂黄酮的提取率计算公式为:
Y(%)=[(0.040A-0.002)×V/V1]×V2/m×100%
式中,A为吸光值;V为测量时定容体积;Vl为检测时所取提取液体积;V2为提取后定容体积;m为山楂果样品质量。
1.2.2微波辅助提取法
1.单因素试验
本试验研究微波提取法提取山楂中总黄酮时的影响因素,将料液比、乙醇浓度(体积分数)、提取时间、微波功率作为主要的考查因素,进行单因素试验和正交试验,从而确定微波提取法提取山楂中总黄酮的最佳提取条件[5]。
(1)料液比
准确称取5份预处理过的山楂粉末,每份1g(精确到0.0001),置于250ml锥形瓶中,分别加入50%的乙醇溶液10ml、20ml、30ml、40ml、50ml,即料液比分别为1:10、l:20、1:30、1:40、1:50,摇匀后静置30min。设置微波功率320W,提取时间1.5min。将提取液过滤后,定容至100ml,按照1.2.1中的方法测定吸光度,并根据标准曲线的回归方程计算出总黄酮的提取率。
(2)乙醇浓度
准确称取5份预处理过的山楂粉末,每份lg(精确到0.0001),置于250ml锥形瓶中,分别加入体积分数为40%、50%、60%、70%、80%的乙醇溶液20ml,摇匀后静置30min。设置微波功率为320W,提取时间为1.5min。将提取液过滤后,定容至100ml,按照1.2.1中的方法测定吸光度,并根据标准曲线的回归方程计算出总黄酮的提取率。
(3)微波时间
准确称取5份预处理过的山楂粉末,每份1g(精确到0.0001),置于250ml锥形瓶中,分别加入50%的乙醇20ml,摇匀后静置30min。设置微波功率为320W,提取时间分别为1min、1.5min、2min、2.5min、3min。
将提取液过滤后,定容至100ml,按照1.2.1中的方法测定吸光度,并根据标准曲线的回归方程计算出总黄酮的提取率。
(4)微波功率
准确称取5份预处理过的山楂粉末,每份1g(精确到0.0001),置于250ml锥形瓶中,分别加入50%的乙醇20ml,摇匀后静置30min。分别在微波功率160W、320W、480W、640W、800W条件下提取1.5min。将提取液过滤后,定容至100ml,按照1.2.1中的方法测定吸光度,并根据标准曲线的回归方程计算出总黄酮的提取率。
2.正交试验
在单因素试验的基础上,对考查的四个因素:料液比、乙醇浓度、提取时间和微波功率,分别选取3个水平作为正交试验的试验水平,建立L9(34)正交表,采用SPSSstatistics16数据分析软件,对试验数据进行分析。
3.3. 验证性试验
根据正交试验的结果,对分析所得最佳条件进行验证性试验[6-9]。
1.2.3快速溶剂萃取法
本试验采用加压溶剂萃取方法,进行山楂中总黄酮的提取,建立了一种山楂中总黄酮提取的新工艺。快速溶剂萃取技术的操作要点为:精确称取10g山楂粉与等量硅藻土混合均匀,装入100ml萃取池中,再取适量硅藻土填充萃取池空隙,密封萃取池,将萃取池和收集瓶放入萃取仪,打开氮气阀门,调节分压为0.8MPa,打开萃取仪电源,仪器自检,自检完成后用清洗溶剂清洗萃取仪管道,设定预热温度开始预热;调节参数开始萃取,萃取完成后,取收集瓶中提取液,并根据1.2.1中的方法测定黄酮提取率。
1.不同溶剂对于快速溶剂提取法提取率的影响
本试验首先采用不同的溶剂对山楂总黄酮的提取效果进行研究,所采用的溶剂分别为水,乙醇,甲醇,乙酸乙酯和50%的乙醇水溶液。
2.单因素试验
(1)提取温度
精确称取10g(精确到0.0001)山楂果粉末5份,分别与等量硅藻土混合均匀,装入100ml萃取池中,再取适量硅藻土填充萃取池空隙,密封萃取池。将萃取池和收集瓶放入萃取仪。设置萃取温度分别为40℃、60℃、80℃、100℃、120℃。萃取剂均为50%乙醇,萃取时间为3min,循环1次。提取完成后,取收集瓶中提取液,根据1.2.1中的方法测定黄酮提取率[10-11]。
(2)提取时间
精确称取10g(精确到0.0001)山楂果粉末5份,分别与等量硅藻土混合均匀,装入100ml萃取池中,再取适量硅藻土填充萃取池空隙,密封萃取池。将萃取池和收集瓶放入萃取仪。设置萃取温度为60℃。萃取剂均为50%乙醇,萃取时间分别为3min、5min、7min、9min、11min,循环1次。提取完成后,取收集瓶中提取液,根据试验1.2.1中的方法测定黄酮提取率[12-16]。
(3)循环次数
精确称取10g(精确到0.0001)山楂果粉末3份,分别与等量硅藻土混合均匀,装入100ml萃取池中,再取适量硅藻土填充萃取池空隙,密封萃取池。将萃取池和收集瓶放入萃取仪。设置萃取温度为60℃。萃取剂均为50%乙醇,萃取时间为3min,循环次数为别为1次、2次、3次。提取完成后,取收集瓶中提取液,根据1.2.1中的方法测定黄酮提取率。
(4)乙醇浓度
精确称取10g(精确到O.0001)山楂果粉末3份,分别与等量硅藻土混合均匀,装入100ml萃取池中,再取适量硅藻土填充萃取池空隙,密封萃取池。将萃取池和收集瓶放入萃取仪。设置萃取温度为60℃。萃取剂分别为10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、90%乙醇,萃取时间为3min,循环1次。提取完成后,取收集瓶中提取液,根据1.2.1中的方法测定黄酮提取率。
3.正交试验
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