血小板衍生生长因子在皮肤创面愈合中的调控机制及药物作用研究

搜索高级搜索

原创毕业论文

血小板衍生生长因子在皮肤创面愈合中的调控机制及药物作用研究

作者: 浏览:4次

免费专业论文
政治工作论文
计算机论文
营销专业论文
工程管理论文范文
医药医学论文范文
法律论文范文
生物专业论文
物理教学论文范文
人力资源论文范文
化学教学论文范文
电子专业论文范文
历史专业论文
电气工程论文
社会学专业论文
英语专业论文
行政管理论文范文
语文专业论文
电子商务论文范文
焊工钳工技师论文
社科文学论文
教育论文范文
数学论文范文
物流论文范文
建筑专业论文
食品专业论文
财务管理论文范文
工商管理论文范文
会计专业论文范文
专业论文格式
化工材料专业论文
英语教学专业论文
电子通信论文范文
旅游管理论文范文
环境科学专业论文
经济论文
人力资源论文范文
营销专业论文范文
财务管理论文范文
物流论文范文
财务会计论文范文
数学教育论文范文
数学与应用数学论文
电子商务论文范文
法律专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文
计算机专业论文
环境艺术专业论文
信息计算科学专业
物流专业论文范文
人力资源论文范文
教育管理论文范文
现代教育技术论文
小学教育论文范文
机械模具专业论文
报告,总结,申请书
理工科专业论文
心理学论文范文
学前教育论文范文

毕业论文范文题目：血小板衍生生长因子在皮肤创面愈合中的调控机制及药物作用研究，论文范文关键词：血小板衍生生长因子在皮肤创面愈合中的调控机制及药物作用研究
血小板衍生生长因子在皮肤创面愈合中的调控机制及药物作用研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：创伤愈合(woundhealing)是指机体遭受外力的作用,使组织出现离断或缺损时,由周围组织细胞再生和纤维性修复的过程。在创伤修复的过程中,常见有瘢痕形成不足,导致创面开裂或者形成慢性溃疡,亦见于感觉丧失区,如糖尿病性周围神经病变可伴有神经源性溃疡等异常情况发生。血小板衍生生长因子(Platelet-derivedgrowthfactor,PDGF)作为一种血清生长因子,能够刺激成纤维细胞、平滑肌细胞、神经胶质细胞等多种细胞的迁移和增殖,在组织修复的纤维化过程,PDGF能够促进细胞外基质成分如胶原、透明质酸等的合成、分泌。PDGF家族包括PDGF-A/-B/-C/-D四种单体,PDGF单体无活性,需要两种相关单体通过二硫键连接形成二聚体。PDGF-BB在临床上常用于促进创面愈合,如慢性糖尿病足的愈合等。MMP-9为基质金属蛋白酶家族中的一种,又称为明胶酶B,主要参与急性创面修复的几个早期过程,包括角质形成细胞从基底膜脱离,促进细胞沿创面基质爬行、纤维蛋白.纤维连接蛋白基质的再塑形等。目前,PDGF-BB应用于创面治疗已显示出独特的效果,但与化学药和传统医药相比,基因工程制药因其生产和应用时间较短,许多与生长因子相关的药理与毒理问题尚未完全解决。而中药在炎症、免疫性疾病中的应用具有悠久历史。由于中药毒副作用小,资源丰富,因此,寻找开发具有促进创面愈合活性的中药新药具有重要的意义。丹皮酚(Paeonol,Pae),是毛茛科植物牡丹Paeoniasuffruticosa和萝摩科植物徐长卿Nanchumpaniculatum.的主要活性成分,具有良好的抗炎、抗变态反应、免疫调节等作用。对于PDGF-BB促进创面愈合的机理,目前已有的研究多局限于PDGF-BB对成纤维细胞增殖的促进作用。本研究结合了PDGFR-β、PDGF-BB以及调节创面愈合进程的另一关键因素——MMP-9,分别从受体表达改变,ECM降解,炎症因子分泌三个角度对PDGF-BB促进创面愈合的机理进行了研究。有研究表明,人皮肤创面在进行愈合时,TNF-α的过高表达（此处忽略..）会抑制愈合进展,导致创面不愈。因此,本研究以TNF-α刺激人真皮成纤维细胞,模拟皮肤创面难愈时的内环境。考察了PDGFR-β,MMP-9在创面难愈内环境下的表达变化。随后应用PDGF-BB与TNF-α共孵育,考察了PDGF-BB对创面难愈内环境下MMP-9的表达调控情况。最后,使用PDGF-BB干预人真皮成纤维细胞,考察PDGF-BB对细胞炎症因子分泌的影响。本研究还同时探讨了丹皮酚对上述各指标的调节作用。通过本课题的研究,有助于进一步阐明PDGF-BB及其受体PDGFR-β在创面愈合中的作用和调控机制,以及是否通过MMP-9这一靶点促进创面愈合,为PDGF-BB促进创面愈合提出可能的机制。同时,还探讨了中药丹皮酚对这些靶点的调控作用,为寻找促进创面愈合的药物提供的了新的思路。第一部分PDGF-β受体在人真皮成纤维细胞中的表达及药物作用研究1.建立了人真皮成纤维细胞原代培养方法,用MTT法考察了丹皮酚对人真皮成纤维细胞生存性的影响。2.RT-PCR法证实,在人真皮成纤维细胞中存在PDGFR-βmRNA表达,10μg·L~(-1)TNF-α可显著上调PDGFR-βmRNA的表达,丹皮酚能抑制TNF-α引起的PDGFR-βmRNA表达上调,且存在良好的剂量关系。3.流式细胞术结果证实,在人真皮成纤维细胞膜表面存在PDGFR-β表达,基础阳性表达率为28.65±0.06%。10μg·L~(-1)TNF-α刺激成纤维细胞24h能显著地上调细胞表面PDGFR-β的阳性表达率,此时的阳性表达率为41.13±5.30%。单独使用100mg·L~(-1)Pae刺激成纤维细胞24h后,PDGFR-β在人真皮成纤维细胞上阳性表达率可显著上调至37.35±0.31%。当使用10μg.L~(-1)TNF-α与不同浓度(10、50、100mg·L~(-1))Pae共刺激时,PDGFR-β阳性表达率分别为41.10±1.29%,39.96±0.91%,33.32±0.95%,结果与仅加10μg·L~(-1)TNF-α相比无统计学差异。上述结果表明,在TNF-α模拟的创面难愈内环境中,PDGFR-βmRNA的表达量和受体在细胞表面的阳性表达率显著上调,受体数目的上调能够增强PDGF-BB效应,更大程度的发挥配体促进成纤维细（此处忽略..）胞迁移增殖等作用,促进创面的愈合。第二部分MMP-9在人真皮成纤维细胞中的表达及药物作用研究1.RT-PCR结果表明,MMP-9mRNA在人真皮成纤维细胞中表达极弱或基本不表达。TNF-α可以诱导MMP-9mRNA的表达,使其上调。TNF-α与不同浓度的Pae共孵育,Pae可以显著抑制TNF-α诱导引起的MMP-9mRNA表达的上调,且呈现出良好的量效关系。2.Westernblotting结果显示,MMP-9在正常人真皮成纤维细胞中表达很弱,10μg·L~(-1)TNF-α可使MMP-9表达显著上调。当TNF-α与不同浓度(10、50、100mg·L~(-1))的Pae共孵育时,MMP-9的蛋白表达出现显著下调,分别下调8.77%、14.04%和10.53%。上述结果表明,在TNF-α模拟的创面难愈内环境中,MMP-9的表达量显著升高,过高的MMP-9表达量会使得ECM过度降解,延长创面愈合时间。第三部分PDGF-BB在人真皮成纤维细胞中对MMP-9表达的影响及药物作用研究1.Westernblotting结果证实,MMP-9在正常人真皮成纤维细胞中表达较弱,10μg·L~(-1)TNF-α可使MMP-9表达显著上调。当使用TNF-α与不同浓度(2、5、10μg·L~(-1))的PDGF-BB共孵育时,PDGF-BB能够显著抑制TNF-α引起的MMP-9表达上调,其中高剂量(10μg·L~(-1))PDGF-BB能够将MMP-9表达量极显著下调44.68%。100mg·L~(-1)Pae与10μg·L~(-1)TNF-α时,也能够显著抑制TNF-α引起的MMP-9表达上调,使得MMP-9表达量下调48.94%。2.ELISA结果显示,正常人真皮成纤维细胞MMP-9分泌基础值较低,为2.328±0.005pg·mL~(-1),10μg·L~(-1)TNF-α刺激24h后,真皮成纤维细胞MMP-9分泌量显著上升至7.371±2.179pg·mL~(-1)。不同浓度(2、5、10μg·L~(-1))PDGF-BB与TNF-α共孵育均可显著降低TNF-α引起的MMP-9分泌增加。100mg·L~(-1)Pae与TNF-α共孵育24h后,MMP-9分泌量也显著下降至2.325±0.001,接近分泌基础值。3.ELISA法检测人真皮成纤维细胞分泌TIMP-1结果表明,成纤维细胞TIMP-1分泌基础值为12.952±0.3161pg·mL（此处忽略..）~(-1),10μg.L~(-1)TNF-α刺激24h后,TIMP-1分泌量上调35.01%;不同浓度(2、5、10μg.L~(-1))PDGF-BB与TNF-α共孵育,TIMP-1出现分泌减少现象,100mg·L~(-1)Pae与TNF-α共孵育24h后,TIMP-1分泌也出现减少现象,分泌量为12.321±1.093pg·mL~(-1)。4.分析人真皮成纤维细胞分泌MMP-9/TIMP-1比值得知,正常人真皮成纤维细胞分泌的MMP-9/TIMP-1基础值为0.180,10μg·L~(-1)TNF-α作用人真皮成纤维细胞24h后,比值上升至0.434。用不同浓度(2、5、10μg·L~(-1))PDGF-BB与TNF-α共孵育后,MMP-9/TIMP-1比值下降,说明平衡向MMP-9减少的方向移动,10mg·L~(-1)Pae也具有和PDGF-BB相似的效果,能降低TNF-α引起的MMP-9/TIMP-1平衡偏移。上述结果表明,在TNF-α模拟的创面难愈内环境中,PDGF-BB能够显著降低MMP-9的表达和分泌,并促使MMP-9/TIMP-1恢复平衡,这可能是PDGF-BB促进创面愈合的机理之一。100mg·L~(-1)丹皮酚对于MMP-9蛋白表达和分泌的下调作用与PDGF-BB相似,提示了其在治疗创面难愈方面具有良好的开发应用潜力。第四部分PDGF-BB对真皮成纤维细胞细胞表达细胞因子、趋化因子的影响及药物作用研究1.采用ELISA法考察了PDGF-BB及Pae对人真皮成纤维细胞分泌IFN-γ的影响,结果表明,人真皮成纤维细胞IFN-γ分泌基础值为28.704±4.4E-15pg·mL~(-1),单独使用10μg·L~(-1)pDGF-BB刺激,分泌量下调12.68%。不同浓度(10、50、100mg·L-1))的Pae分别与PDGF-BB共孵育后,与对照组相比,50mg·L-1Pae能显著增加IFN-γ分泌量。2.采用ELISA法考察了PDGF-BB及Pae对人真皮成纤维细胞分泌IL-6的影响,人真皮成纤维细胞IL-6分泌基础值为193.965±22.634pg·mL~(-1);单独使用10μg.L~(-1)IPDGF-BB刺激,IL-6分泌值上调至238.513±11.568pg·mL~(-1)。不同浓度(10、50、100mg·L-1)的Pae分别与PDGF-BB共孵育,IL-6分泌值均有显著下调。3.采用ELISA法考察了PDGF-BB及Pae对人真（略..）皮成纤维细胞分泌IL-8的影响,人真皮成纤维细胞IL-8分泌基础值为755.042±34.113pg·mL~(-1);单独使用10μg·L~(-1)pDGF-BB刺激,IL-8分泌值上调至1025.120±71.775pg·mL~(-1)上调35.77%。,Pae与PDGF-BB共孵育,与对照组相比,IL-8分泌量均有所下调,其中,10mg·L-1Pae下调极为显著,50、100mg·L-1Pae分别将IL-8分泌量下调20.49%和22.73%。上述结果表明,PDGF-BB可以诱导人真皮成纤维细胞产生细胞因子IL-6、IL-8。同时对抗炎因子IFN-γ的分泌起到抑制作用。增强炎症反应也可能是PDGF-BB促进创面愈合作用的机理。丹皮酚能够显著抑制PDGF-BB引起的人真皮成纤维IL-6、IL-8分泌上调,显示了其具有良好的抗炎活性。若在临床合理利用丹皮酚抑制IL-6、IL-8的药理特性可能减少愈合过程中瘢痕的形成。

以上为本篇毕业论文范文血小板衍生生长因子在皮肤创面愈合中的调控机制及药物作用研究的介绍部分。

本论文在医药医学论文栏目，由论文网(www.zjwd.net)整理,更多论文,请点论文范文查找

收费专业论文
汉语言文学论文
物理学论文
自动化专业论文
测控技术专业论文
历史学专业论文
机械模具专业论文
金融专业论文
电子通信专业论文
材料科学专业论文
英语专业论文
会计专业论文
行政管理专业论文
财务管理专业论文
电子商务国贸专业
法律专业论文
教育技术学专业论文
物流专业论文
人力资源专业论文
生物工程专业论文
市场营销专业论文
土木工程专业论文
化学工程专业论文
文化产业管理论文
工商管理专业论文
护理专业论文
数学教育专业论文
数学与应用数学专业
心理学专业论文
信息管理专业论文
工程管理专业论文
工业工程专业论文
制药工程专业论文
电子机电信息论文
现代教育技术专业
新闻专业论文
热能与动力设计论文
教育管理专业论文
日语专业论文
德语专业论文
轻化工程专业论文
社会工作专业论文
乡镇企业管理
给水排水专业
服装设计专业论文
电视制片管理专业
旅游管理专业论文
物业管理专业论文
信息管理专业论文
包装工程专业论文
印刷工程专业论文
动画专业论文
营销专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文范文
法律专业论文范文
教育管理论文范文
小学教育论文范文
学前教育论文范文
财务会计论文范文

电子商务论文范文

上一篇：高频超声在肘管综合征中的临床应用

下一篇：胚胎大鼠背根神经节体外培养的实..