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AtNHX1基因对荞麦的遗传转化及抗盐再生植株的获得

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毕业论文范文题目:AtNHX1基因对荞麦的遗传转化及抗盐再生植株的获得,论文范文关键词:AtNHX1基因对荞麦的遗传转化及抗盐再生植株的获得
AtNHX1基因对荞麦的遗传转化及抗盐再生植株的获得毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:荞麦是蓼科(Polygonaceae)、荞麦属(FagopyrumMill)双子叶作物,全世界范畴内只有个别荞麦(F.esculentum)跟鞑靼荞麦(F.tartaricum)两个栽培种。荞麦籽粒中富含黄酮、类黄酮、固醇跟硫胺类结合蛋白,它们对一些慢性疾病存在潜在的疗效。荞麦中80%的类黄酮物质是芦丁,即芸香甙(槲皮素-3-芸香葡糖甙),它可能降落血压跟血管的通透性,避免动脉硬化跟毛细管脆性增加引起的出血症,并存在抗浮肿(本文此处忽略..)跟抗氧化活性。荞麦是对盐敏感的淡土动物,泥土中的盐分对荞麦的成长跟产量有较大的影响,因此培养耐盐的荞麦品种存在事实的意思。将抗盐基因转移到受体动物基因组中,是改良受体动物盐胁迫耐受才能的重要道路之一。本实验以荞麦子叶跟下胚轴为外植体引诱胚性愈伤组织并获得再生植株,同时树破起一套有效的荞麦转化体系,为荞麦的遗传改进跟基本研究奠定了基本。在附加2.0mg/L6-BA、0.1mg/LIAA跟1mg/LKT的MS培养(文章此处忽略..)基上,愈伤组织可能间接分化构成大量的不定芽。通过对外植体转化频率进行统计学分析,探讨了预培养时光、感染时光、共培养时光跟农杆菌参加方法等不同因素对LBA4404菌株(含有pHZX1质粒)转化荞麦的影响。成果表明外植体预培养2d、浸染20~25min、共培养1~2d可能得到较多数量的阳性转基因植株。影响农杆菌转化效力的另一个因素乙酰丁香酮(AS)对荞麦转化频率不明显影响。利用优化的转化体系,将拟南芥液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋(此处忽略..)白基因AtNHX1通过农杆菌介导法转入到荞麦中,在附加2.0mg/L6-BA、0.1mg/LIAA、1mg/LKT、50mg/L卡那霉素跟500mg/L头孢霉素的MS培养基长进行抉择培养,获得转基因植株。经PCR、RT-PCR、Southern印迹跟Northern印迹分析,初步证明AtNHX1基因已整合至荞麦基因组。用200mmol/L的盐水对转基因植株跟对比植株胁迫处理6周,转基因植株可能生存,而对比植株逝世亡。用不同浓度的N(文章此处忽略..)aCl溶液处理转基因植株跟对比植株,发明Na~+在转基因植株叶片中的积聚程度明显高于对比植株。次生代谢产物黄酮类化合物芦丁在转基因植株根、茎跟叶片中的含量也比对比植株明显要高。这些成果表明AtNHX1基因已经被成功地转入荞麦中,同时也证明了利用基因工程手段进步作物对盐胁迫耐受才能的可行性。


以上为本篇毕业论文范文AtNHX1基因对荞麦的遗传转化及抗盐再生植株的获得的介绍部分。
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