家蚕成品卵微孢子虫McAb-ELISA检测方法的研究

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家蚕成品卵微孢子虫McAb-ELISA检测方法的研究

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毕业论文范文题目：家蚕成品卵微孢子虫McAb-ELISA检测方法的研究，论文范文关键词：家蚕成品卵微孢子虫McAb-ELISA检测方法的研究
家蚕成品卵微孢子虫McAb-ELISA检测方法的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：家蚕微粒子病(Pebrinedisease)是由家蚕微孢子虫(Nosemabombycis简称Nb)寄生而引起家蚕疾病,是一种分布很广的感染性蚕病,因为其特别的经卵感染方法,对蚕业出产造成重大威胁,也是蚕种出产上独一的检疫对象。目前出产上履行母蛾测验轨制,淘汰有毒母蛾所产蚕卵,以供给“无毒”蚕种,从而保障了蚕业出产的保险。而成品卵测验检疫作为“补正检查”（文章此处忽略..）的方法,近多少年也得到广泛关注跟作为农业部标准的备检名目,现行出产中的母蛾测验跟成品卵测验重要用光学显微镜进行的。跟着科学技巧的进步跟出产实际须要,利用古代分子生物学技巧跟免疫学技巧进内行蚕微粒子病检测实用技巧的开发,也是业内非常关注的问题。口岸体系对进出口蚕种承担着较大的义务,目前采取的仍然是显微镜镜检法,存在必定危险。研究开发一种基于免疫学技（略..）巧,能用于家蚕产品进出口中家蚕微粒子病检疫的方法是必要的。抗Nb孢子名义蛋白的多抗辨认抗原表位多,但与单抗比拟,存在穿插反应跟灵敏度低等问题。本实验利用多抗辨认抗原表位较多、轻易捕获孢子跟单抗对Nb孢子特异性较强的特点,通过将酶直接标记于单克隆抗体上,用意获得一种简单实用的双抗体夹心ELISA检测方法。用纯化的家蚕微孢子虫抗兔多抗包被,作为捕获抗（本文此处忽略..）原,参加检测样品,而后用辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体作为检测抗原,树破双抗体夹心ELISA检测方法,并对各步实验前提进行优化。研究表明,用液氮冻融加研磨的方法对微孢子虫进行处理后,包被后果明显进步。制备的单抗经westernblotting验证,辨认的是孢子的名义抗原。多抗最适包被浓度为10μg/ml,最适包被前提为4℃过夜,酶标二抗工作浓度为1:2000,待（此处忽略..）检样品跟酶标二抗的反应时光分辨为37℃1.5h跟1h,底物于37℃显色15min。用所树破的双抗体夹心ELISA检测方法进行了灵敏度检测,成果显示:对纯化孢子的检测量为3.125×105spores/ml,对“添毒”蚕卵的检测量为5×106spores/ml。可能用于实际出产中的检测,灵敏度有待于进一步研究加以进步。

以上为本篇毕业论文范文家蚕成品卵微孢子虫McAb-ELISA检测方法的研究的介绍部分。

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