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AQP1基因敲除鼠滋润细胞水通透性的变更研究

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毕业论文范文题目:AQP1基因敲除鼠滋润细胞水通透性的变更研究,论文范文关键词:AQP1基因敲除鼠滋润细胞水通透性的变更研究
AQP1基因敲除鼠滋润细胞水通透性的变更研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:母胎液体均衡对全部妊娠过程至关重要,畸形的羊水量也是胎儿活动、成长跟发育所必须的。胎盘作为机体妊娠期间的常设器官,在母胎液体交换及养分物质代谢等过程中发挥重要作用。水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是一类对水存在高度抉择性的糖蛋白,可能根据浸透压或流体静脉压介导水疾速被动地跨生物膜转运。迄今为止,已发明13种水通道蛋白(AQP0~12)存在于哺乳动物中,其表白、分布及相干功能研究也已被陆续报道。众多研究已证明多种水通道蛋白基因在人、鼠及羊等哺乳动物的胎盘、胎膜组织中分布表白,提示AQPs可能在妊娠生理,尤其是母胎液体均衡中发挥关键作用。课题组前期研究已证明AQP1基因敲除孕鼠的相干妊娠表型产生变更,提供了AQP1在妊娠生理及羊水均衡中的直接证据。本课题利用AQP1敲除(本文此处忽略..)小鼠模型树破了孕鼠胎盘滋润细胞体外培养体系,通过测试AQP1基因敲除型滋润细胞与野生型滋润细胞的水通透性差别,从功能方面提供了AQP1在母胎液体均衡中发挥作用的直接证据。另外,本课题对AQP1基因敲除型滋润细胞的迁徙才能做了初步研究,为AQP1基因在产科相干疾病及妊娠滋润细胞疾病中的作用提供了实际基本。第一部分AQP1基因敲除鼠滋润细胞水通透性的变更研究第一章野生型及AQP1基因敲除型胎盘滋润细胞的培养及鉴定【研究目标】培养合乎实验请求的野生型(wildtype,AQP1+/+)及AQP1基因敲除型(AQP1-knockout,AQP1-/-)胎盘滋润细胞。【方法】成年健康野生型CD1小鼠(AQP1+/+)及AQP1基因敲除小鼠(AQP1+/+)分辨按雌雄小鼠等量合笼交配,第二日检出阴道栓者记为妊(文章此处忽略..)娠第1天(1gestationalday,1GD)。选取12GD孕鼠的胎盘组织,利用组织块培养法对AQP1+/+及AQP1-/-胎盘组织进行滋润细胞原代培养;胰蛋白酶消化法进行传代培养;利用滋润细胞内的特异细胞骨架蛋白细胞角蛋白7(CK-7)进行免疫化学染色细胞鉴定。【成果】组织块培养第2日细胞便开端从组织块边沿向四周成长,数日后细胞呈片状铺展成长;15日即可进行细胞传代;两组滋润细胞在肉眼可见的大小、状况及成长情况未见明显差别。细胞角蛋白7(CK-7)染色示细胞纯度达95%以上。【论断】成功树破了野生型跟AQP1基因敲除型滋润细胞体外培养体系,以备本研究后续实验之用。第二章野生型及AQP1基因敲除型滋润细胞水通透性测定【研究目标】课题组前期研究显示AQP1基因敲除小鼠母胎液体均衡受损,本研究通过检测AQ(略..)P1基因敲除型滋润细胞水通透性的变更,直接从功能上探讨AQP1在母胎液体均衡中的作用。【方法】1.利用免疫荧光方法证明AQP1基因在滋润细胞的表白。2.利用钙黄绿素荧光淬灭方法对成功培养的AQP1基因敲除型(AQP1-/-)与野生型(AQP1+/+)滋润细胞进行细胞质膜水通透性分析比较。【成果】1.免疫荧光成果显示AQP1在野生型滋润细胞膜表白。2.滋润细胞质膜水通透性分析显示:低渗液情况下,AQP1-/-滋润细胞水通透性明显低于AQP1+/+(P=0.009),仅为野生型孕鼠滋润细胞的57%;高渗液情况下,AQP1-/-滋润细胞水通透性明显低于AQP1+/+(P=0.036),其水通透性仅为野生型孕鼠滋润细胞的64%。【论断】研究成果显示AQP1基因敲除型滋润细胞水通透性明显低于野生型,从功能方面提供了AQP1在母胎液体均衡中发(本文此处忽略..)挥重要作用的直接证据。第二部分AQP1基因敲除型滋润细胞迁徙变更的初步研究【研究目标】研究体外培养野生型及AQP1基因敲除型孕鼠胎盘滋润细胞划痕伤害后,细胞迁徙行动的变更。【方法】利用传代培养的野生型及AQP1基因敲除型小鼠胎盘滋润细胞制造划痕伤害模型,察看划痕伤害后两组细胞的迁徙情况变更。【成果】划痕伤害后,AQP1基因敲除型滋润细胞划痕处细胞迁徙数明显低于野生型滋润细胞数量。【论断】AQP1基因在滋润细胞迁徙过程发挥重要作用,尤其是创伤后的迁徙修复。


以上为本篇毕业论文范文AQP1基因敲除鼠滋润细胞水通透性的变更研究的介绍部分。
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