重组人粒细胞集落刺激因子脂质体的研究

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重组人粒细胞集落刺激因子脂质体的研究

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毕业论文范文题目：重组人粒细胞集落刺激因子脂质体的研究，论文范文关键词：重组人粒细胞集落刺激因子脂质体的研究
重组人粒细胞集落刺激因子脂质体的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：重组人粒细胞集落刺激因子(RecombinantHumanGranulocyteColonyStimulatingFactor,rhG-CSF)是用DNA重组技术制备的蛋白质多肽类生物技术药物,可促进粒细胞集落的形成和造血干细胞向白细胞分化、增殖和成熟,并作用于成熟的中性粒细胞,延长其寿命,增强其游走、吞噬活性。由于口服给药易受消化液、酶系统及菌群的分解破坏,稳定性差,生物利用度低,目前国内外临床均采用注射给药。rhG-CSF在体内清除快,半衰期短,注射给药病人的依从性差。采用现代药物制剂新技术,选用rhG-CSF为模型药物,以脂质体为载体,设计前体脂质体法(pro-liposomes),研制成重组人粒细胞集落刺激因子脂质体(RecombinantHumanGranulocyteColonyStimulatingFactorliposomes,rhG-CSF-Lip)新剂型。脂质体具有类生物膜结构,有着良好的细胞亲和性和组织相容性。将（文章此处忽略..）蛋白质类药物rhG-CSF包裹在脂质双分子层中,不仅可避免体内各种酶的破坏,提高药物的稳定性,且药物从脂质体中缓慢释放,可有效地延长药物的生物半衰期,达到长效目的,具有很高的科学技术价值和实践应用前景。主要研究内容及结果:1.rhG-CSF-Lip处方与制备工艺研究采用前体脂质体法制备rhG-CSF-Lip,在单因素考察的基础上进行均匀设计,优化筛选最佳处方与制备工艺;采用电子显微镜观察脂质体的物理外观形态,激光散射粒度分布与电势分析仪测定脂质体的粒径、粒度分布和Zeta电位,以生物活性法测定脂质体的载药量和包封率。结果:制得rhG-CSF-Lip物理外观圆整、分布均匀,算术平均粒径为(195.2±40.8)mm,粒径分布在125～250nm范围内;载药量为(4.95±0.08)%;包封率为(84.3±0.75)%;Zeta电位为—(45.5±2.97)mV。2.rhG-CSF-Lip质量控制方法与标准的研究建立了rhG-CSF-Lip质量控制的生物活性测定方法:利用人粒细胞集落刺激因子(HumanGranu（文章此处忽略..）locyteColonyStimulatingFactor,rhG-CSF)依赖细胞株NFS-60在不同浓度G-CSF下的生长情况,与标准品对比得出rhG-CSF的含量,测定的rhG-CSF含量是具有生物活性的rhG-CSF。在测定细胞的范围内,rhG-CSF浓度的对数剂量与吸收度线性关系良好,线性方程为:Y=0.2859logX-0.4806(r=0.9999);日内精密度(低、中、高浓度)RSD分别为0.72%、0.47%、0.56%;日间精密度(低、中、高三浓度)RSD分别为0.75%、0.44%、0.61%;回收率(低、中、高浓度)分别为(99.21±0.70)%、(99.39±0.61)%、(99.51±0.51)%,RSD分别为0.70%、0.62%、0.52%;加样回收率(低、中、高浓度)分别为(100.1±0.86)%、(99.8±0.8)%、(100.2±0.73)%。3.体外释药动力学及初步稳定性研究rhG-CSF脂质体的体外释放数学模型可用双相动力学方程拟合,回归方程为100-Q=0.7361e~(-0.3064t)+0.9616e~(-0.0392t),释药前期为快速释放相,后期为慢速释放相;rhG-CSF注射液为一级释药动力学。rhG-CSF-Lip较rhG-CSF注射液具有显著的缓释特征。（文章此处忽略..）维生素E作为抗氧剂加入脂质体,可显著降低脂质体的氧化指数,制得rhG-CSF脂质体氧化指数为0.10±0.02;在2～8℃的条件下放置6个月,氧化指数与0月比较未有显著性差异;采用~(60)C_o辐射灭菌,脂质体稳定。4.家兔体内药物动力学研究采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血浆中rhG-CSF含量,灵敏度高,测定范围0～4000pg/ml。家兔静脉注射rhG-CSF后,体内药物动力学符合双室模型特征,t_(1/2α)和t_(1/2β)分别为0.118h和1.786h;家兔静脉注射rhG-CSF脂质体后,体内药物动力学符合双室模型特征,t_(1/2α)和t_(1/2β)分别为0.345h和3.518h。制成rhG-CSF-Lip后,在家兔体内的消除半衰期显著延长。结论:rhG-CSF为蛋白质多肽类生物技术药物,口服给药吸收困难,理化性质不稳定,易受消化液pH、菌群、酶系统分解和破坏,稳定性差,生物利用度低;目前国内外仅有注射液应用于临床,由于rhG-CSF在体内清除快、半衰期短,使临床用药受到限制。采用前体脂质体技术,（文章此处忽略..）制成rhG-CSF-Lip后,可显著改变rhG-CSF在生物体内的药物动力学性质,生物半衰期t_(1/2β)由1.786h延长至3.518h,不仅可达长效目的,且稳定性显著提高,各项指标达到设计目的和要求,可为rhG-CSF新剂型开发研究提供科学的理论依据,具有很高的科学价值和实际应用前景,该项研究,国内外尚未见报道。

以上为本篇毕业论文范文重组人粒细胞集落刺激因子脂质体的研究的介绍部分。

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