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茵陈及其制剂中主要成分的含量测定方法概述 (2)(二)
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茵陈及其制剂中主要成分的含量测定方法概述 (2)(二)
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茵陈及其制剂中主要成分的含量测定方法概述 (2)(二)
茵陈及其制剂中主要成分的含量测定方法概述 (2)(二)毕业论文范文介绍开始:
在实际应用中茵陈的主要有效成分为绿原酸〔5〕, 因此准确测定绿原酸的含量对控制茵陈药材的质量具有重要意义。本文总结了一些茵陈药材及其制剂中绿原酸的含量测定方法。
2.1 茵陈及护肝片利胆片中绿原酸含量
王文清副主任药师, 博士采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法, 在327nm波长处测定茵陈(购自武汉国药有限公司), 批号:050101, 050102, 050103)及其制剂利胆片(自制, 由大黄、金钱草、柴胡、白芍、大青叶、黄芩、茵陈等组成, 批号:050307,050308, 050309)、护肝片(自制,由柴胡、茵陈、板蓝根、五味子、绿豆等组成,批号:050401, 050402,050403)中绿原酸的含量,结果表明绿原酸在4.9~ 78.4μg· mL-1 的浓度范围内线性关系良好;精密度RSD为0.87%, 稳定性 RSD为 0.92%;利胆片 (批号:050307)、护肝片 (批号:050401)绿原酸平均含量分别为0.278 mg·g-1 (RSD=1.24%)、1.252mg·g-1 (RSD=1.57%);茵陈、利胆片、护肝片,平均回收率分别为:98.5%(RSD=1.32%), 99.0%(RSD=0.81%), 98.4%(RSD=0.52%);测定结果见表 1。
表 1 样品中绿原酸的含量测定结果 n=3, x±s
样品与批号
绿原酸含量 /(mg· g-1 )
RSD/%
茵陈药材
050101
3.612±0.037
1.03
050102
3.853±0.051
1.32
050103
3.524±0.052
1.48
利胆片
050307
0.278±0.034
1.24
050308
0.283±0.033
1.16
050309
0.264±0.025
0.94
护肝片
050401
1.252±0.019
1.57
050402
050403
1.267±0.022
1.221±0.013
1.73
1.08
本法简便 ,流动相配比简单,重复性好,可以为茵陈药材及其制剂中绿原酸的含量提供参考 。
2.2不同产地绿原酸含量
刘影,于治国等采用反相高效液相色谱法, 以Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm ,5μm),在波长327nm 处检测,结果表明绿原酸线性范围为9.5~95 mg L-1,r =0.9999(n =6),平均回收率为100.9%,RSD为0.88%,该方法简便、准确、重复性好 ,可作为茵陈药材质量控制的方法 。测定结果见表 2。
表 2 茵陈中绿原酸含量测定结果(n=2)
产地
绿原酸含量(%)
山西
0.8787
河北
0.3945
辽宁
0.5399
四川
0.5302
陕西
1.236
安徽
0.5958
宁夏
0.9910
贵州
0.8534
三.茵陈药材中总香豆素的含量测定方法
茵陈具有清湿热、退黄疸的功效是临床上常用的保肝中药, 其药效物质基础主要为香豆素类化合物 , 现代研究表明 , 茵陈中的香豆素类化合物具有抗四氯化碳和半乳糖胺诱发的大鼠肝细胞毒性作用[7], 因此 , 茵陈中总香豆素含量的高低, 是中药茵陈品质评价的重要指标之一[11]。
3.1茵陈药材中总香豆素的含量测定
万丽,叶娉等以滨蒿内酯为对照品, 采用紫外分光光度法, 在340 nm波长处测定各个产地茵陈药材中总香豆素的含量,结果表明滨蒿内酯在 0.0080 ~ 0.0482 mg/mL范围内浓度与吸光度线性关系良好,精密度RSD为0.51%, 稳定性 RSD为 0.67%和 0.71%, 重复性 RSD为 1.41%, 平均回收率为 100.12%、RSD为1.33%,测定结果见表 3。
表 3 不同产地茵陈中总香豆素的测定结果 (n=3)
茵陈药材来源
品种
总香豆素含量 (%)
四川
ArtemisiascopariaWaldst.etKit.
3.037
山西
ArtemisiacapillarisThunb.
2.820
辽宁
ArtemisiacapillarisThunb.
3.508
广西
ArtemisiacapillarisThunb.
3.224
陕西
ArtemisiascopariaWaldst.etKit.
2.978
河南
ArtemisiacapillarisThunb.
3.011
安徽
ArtemisiascopariaWaldst.etKit.
2.860
新疆
ArtemisiascopariaWaldst.etKit.
2.710
从表 3可知 , 茵陈药材中总香豆素的平均含量为2.981%,各个产地药材之间总香豆素的含量有较大的差异 。
3.2 茵陈蒿及其复方制剂中6,7-二甲氧基香豆素含量测定
王喜军,孙晖等采用HPLC法(ODS柱4.6mm×250mm),在345nm处测定茵陈蒿生药及茵陈五苓散中总香豆素(简称DE)含量,其测定实验数据如表4,表5.
表 4 生药中DE的测定结果
表 5 茵陈五苓散中DE的测定结果
结果表明茵陈蒿生药平均值在DE加前平均值0.6411,DE加后平均值0.9261,及茵陈五苓散中DE加前平均值0.3487,DE加后平均值0.4313。
四. 茵陈花蕾期黄酮类的含量测定方法
药理实验证明,黄酮类成分除了对四氯化碳损伤的原代培养大鼠肝细胞具有增强活力的作用, 有的还具有降低谷丙转氨酶的作用。
林生,张启伟等在滨蒿花蕾期样品中分离得到4个黄酮类化合物:5,7,4′-三羟基-6,2′,5′-三甲氧基黄酮(arcapillin),5,3′,4′-三羟基-6,7-二甲氧基黄酮(cirsiliol),蓟黄素(cirsimaritin)和3′-甲氧基蓟黄素(cirsilineol)并建立其成分的含量测定方法.方法:样品用醋酸乙酯超声提取30 min.Kromasil ODS柱,流动相乙腈-四氢呋喃-1%醋酸水溶液(2.5∶21.5∶76),检测波长347 nm.结果表明:茵陈花蕾中的4个黄酮类成分5,7,4′-三羟基-6,2′,5′-三甲氧基黄酮;5,3′,4′-三羟基-6,7-二甲氧基黄酮;蓟黄素和3′-甲氧基蓟黄素在该色谱条件下获良好分离,分别在0.035~0.56,0.043~0.69,0.040~0.65,0.040~0.64 μg线性关系良好(r=0.9992,0.9999,0.9997,0.9997),加样回收率分别为96.8%,97.3%,96.8%,98.5%,重复性分别为2.5%,3.0%,1.5%,3.2%.该方法分离度好,为花蕾期茵陈及其制剂的质量控制提供依据。测定结果见表 6。
表 6 arcapillin,cirsiliol,cirsimaritin,cirsilineol测定结果
五.茵陈及其复方制剂中色原酮的含量测定方法
5.1 茵陈花穗中色原酮的含量测定
李长格等用硅胶柱层法 ,从茵陈篙花穗的甲醇浸裔中除分离得到二甲基七叶亭和茵陈色原酮之外 ,还分离得7一甲基茵陈色原酮 、4一 甲基 茵陈色原酮 、6一去甲氧基茵陈色原酮及6一去甲氧基 , 4 `一甲基茵陈色原附四个茵陈色原酮的类似物 ,因为茵陈色原酮是茵陈筒的主要利胆有效成分 ,因此用硅胶薄层层折法测定茵陈花穗中的茵陈色原酮含量,研究了它随季节的消长情况, 实验结果显示其在8-9月份是含量最高,约为1.72%。
表 5 茵陈色原酮随季节消长情况
5.2 茵陈蒿及其复方制剂中色原酮含量测定
王喜军,孙晖等采用HPLC法(ODS柱4.6mm×250mm),在345nm处测定茵陈蒿生药及茵陈五苓散中色原酮(简称CAP)含量,其测定实验数据如表,表7,表8.
表7茵陈蒿生药中CAP测定结果
表8茵陈五苓散中CAP测定结构
结果表明茵陈蒿生药平均值在CAP加前平均值0.2652,CAP加后平均值0.4626,及茵陈五苓散中CAP加前平均值0.0910,CAP加后平均值0.1886。
六.茵陈中挥发油含量的测定方法
曾有报道从茵陈蒿根的提取物及茎,叶挥发油中分得多种新的炔类化合物: O 一甲氧基茵陈二炔 、茵陈炔醉、去甲茵陈二炔及新茵陈二炔 。用茵陈篙1kg , 经水蒸汽蒸馏后,馏液用乙醚萃取,得挥发油88.3克 (得率为0 . 8 0 3 % ) , 取挥发油8 0克依次用5 % 碳酸钠及5 %氢氧化钠处理, 分成三部分:中性部分 (79.1克) 、酚性部分(0.66克)及少量酸性部分。中性部分经氧化铝柱层析及液制备层析分离 , 用红外、核磁共振 、质谱及紫外等光谱鉴定 ,证明含邪种化合物 ,其中单菇化合物17种 , 倍半掂8种, 炔类化合物6种 , 其它类型化合2种. 茵陈二炔为其中的主要成分, 占总油量的8 0 .2% 。酚性部分占总油量的0. 8 % , 经气液制备层析分离 ,与标准品的质谱 、红外 、核磁共振和 Rf值比较 , 鉴定含丁香酚等7种化合物 。酸性部分只占总油量的0 . 2 % , 经重氮甲烷甲基化后 ,用气相层析一质谱鉴定 ,全部为C4 一C 1 8直链的饱和脂肪酸 , 除棕搁酸含蚤稍高( 0 .1 % )外,其余14种均为微量 。
总结
茵陈及其制剂中在实际应用中具有多种重要作用,因此本文对其主要成分的含量测定方法的一些总结为科学研究等提供了依据,也为茵陈质量控制提供借鉴和数据参考,其中很多实验都方便易行,希望为其他科学工作者的工作提供一些有用的帮助。
参考文献
[1]中国药典 2005 版[ S] . 一部. 2005. 166.
[2]董岩;王新芳;崔长军;付风刚;;茵陈蒿的化学成分和药理作用研究进展[J];时珍国医国药;2008年04期
[3]周贻谋;;保肝利胆要药茵陈[J];家庭医学;2008年02期
[4]黄红娟;蔡恒骥;魏跃钢;;复方茵陈方对脾胃湿热型雄激素源性脱发患者头皮油脂分泌情况的影响[J];南京中医药大学学报;2011年01期
[5]郑虎占, 董泽宏 , 佘靖. 中药现代研究与应用 [ M] . (第 4 卷). 北京:学苑出版社, 1998. 3095.
[6]林生,张启伟. 高效液相色谱法测定花蕾期茵陈中黄酮类成分的含量[A].1001-5302(2005)08-0591-04
[7]谢韬, 梁敬钰, 刘净 .茵陈化学成分和药理作用研究 进展 [ J] .海峡药学, 2004, 16 (1):8.
[8] 曾美怡, 张启伟, 姚三桃, 等 .茵陈的化学成分和质 量评价研究 [ J] .国外医学• 中医中药分册, 1987, 9 (6):1
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[10] 孙秀燕, 邢山闽, 李明慧, 等 .用液相色谱 -质谱联 用法测定滨蒿中的茵陈色原酮 [ J] .沈阳药科大学学 报, 2003, 17 (2):110.
[11] 王喜军, 孙晖, 刘中申 .茵陈蒿及其复方制剂中 6, 7 -二甲氧基香豆素和茵陈色原酮的定量研究 [ J] .
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