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山楂中黄酮类化合物的测定方法(二)
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山楂中黄酮类化合物的测定方法(二)
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山楂中黄酮类化合物的测定方法(二)
山楂中黄酮类化合物的测定方法(二)毕业论文范文介绍开始:
山楂中黄酮类化合物的测定方法
二、山楂中黄酮类化合物的提取方法
(一)水提法
水提法,是利用黄酮类化合物在水中的溶解度的原理进行提取,该法操作简单,经济安全,但是提取物中杂质含量较高,给后续的提纯带来困难。刘巧利【8】等人通过水提法提取山楂中总黄酮,经试验得到最佳艺参数:水提取3次,加水倍量14、12、12倍,浸泡60min,提取时间3.0、2.5、2.5h,在此最优条件下得到黄酮类化合物的平均质量分数为25.61mg/g。
(二)有机溶剂提取法
有机溶剂提取法是利用黄酮类化合物在有机溶剂中的溶解度进行提取,常用的溶剂有甲醇、乙醇等,此法较水提法产率增加,杂质量减少,同时成本提高。超声提取法主要是利用超声的空化作用,使黄酮类化合物快速低溶出。此法具有提取时间短,产率较高,操作简单等优点。
(三)微波法
微波法是利用微波的超高频率的振动,使分子间相互碰撞,挤压进而有效成分的浸出。郭梅【7】等以乙醇为溶剂,通过微波法提取黄酮类化合物,确定了最佳工艺参数:乙醇溶剂的浓度为60%,料液比为1:40(g/ml),
微波功率为400w,萃取时间120s。在此条件下,黄酮类化合物地率达3.19%。
(四)酶解法
酶解法主要是利用酶破坏细胞壁结构及其细胞间相连的果胶物质,减小有效物质的传质阻力,提高提取效率。酶法具有反应条件温和、提取效率高等优点,但是酶不稳定,易失活,限制了其更为广泛的应用。刘晓光等研究了纤维素酶为原料,通过酶解法提取山楂黄酮的最佳工艺。试验结果表明:在最佳条件,即:酶质量浓度为0.15mg/ml,酶解ph为5.0,酶解温度为55℃,酶解时间为90min,料液比为1:12(g:g)下,黄酮的得率可达到5.5%以上,同时不影响黄酮类化合物的活性。
三、山楂中黄酮类化合物的分析法
(一)紫外分光光度计法
分光光度计法根据不同溶剂分为亚硝酸钠-硝酸铝法、ALCL3法亚硝酸钠-硝酸铝法是根据黄酮类化合物与NaNo2、Al(NO3)3、NaOH作用生成红色物质来测定黄酮类化合物的含量。AlCl3法是利用AL3n与黄酮类化合物络合显色来测定黄酮类化合物的含量。霍红等以乙醇回流和超声辅助提取了山楂中黄酮类物质,并芦丁为标准品,在510nm处测定提取物的紫外吸收的吸光度,经测定得到黄酮含量为4.112%.
(二)高效色谱法
高效液相色谱法,具有准确性高,分离效果好,分析速度快等优点,但是在选择色谱条件方面存在困难。王光忠等建立了高效液相色谱法测定山楂总黄酮提取物中金丝桃苷和芦丁的含量的测定方法,确立了最佳色谱条件即:色谱柱Kromasil C11色谱柱(4.6mm*250mm,7um),流速1.0ml/min;进样置10ul,柱温25℃,流泪相:甲醇-0.4%磷酸溶液(30:70),检测波长为359mm。在此基础上调整流动相中磷酸的浓度,也可以改善峰行和分离度 。
(三)平面色谱法
平面色谱法是色谱的一种。包括在纸上进行的纸色谱法和在薄层板上进行的薄层色谱法。由于纸色谱法的选择性和重现性较差,多用于定性分析。余戟等采用高于临界胶束浓度的十二烷基硫酸钠,溴化十二烷基甲基卞铵水溶液作展开剂,通过纸色谱法分离和检测桑色素、杨梅黄素等8众黄酮苷和苷元,并发现0101-0102mol/L的sds或bzbr胶束展开体系适宜与分离黄酮苷类。
四、小结
实验结果表明,山楂叶及山楂原种的总黄酮含量都很高,而二者大多被抛弃不用或 在原产地自生自灭,造成资源的极大浪费。此外,山楂果实和叶中都含有黄酮类成分。因此山楂除可作水果与传统中药外,还可开发为黄酮类药物,为心血管及癌症疾病患者提供新型药物。目前我国在这方面的药物大多依赖进口,国内开发的产品几乎是空白,而我国山楂资源十分丰富,其开发利用仍有很大潜力。
参考文献:
[1] 何心亮. 北山楂与南山楂化学成分的比较【J】。中草药,1990.21(4):4-6
[2] 郭梅,任效东,王娜等微波辅助提取山楂黄酮类化合物的工艺{J}食品研究与开发,2012,33(3)-51-54
[3]侯宽照,中国种子植物科属辞典{M}。北京;科学出版社,1958:115
[4] David S.Plant secondary metabolism{M}.Holand,Kluwer academic publishers,1998:150-192
[5] 赵焕淳,丰宝田,中国果树志。山楂卷{M}。北京:中国林业出版社,1996
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