电气工程
会计论文
金融论文
国际贸易
财务管理
人力资源
学前教育
德语论文
工程管理
文化产业
机械设计
汉语文学
英语论文
物流论文
电子商务
法律论文
工商管理
旅游管理
市场营销
药学论文
制药工程
生物工程
包装工程
模具设计
测控专业
工业工程
教育管理
行政管理
计算机论
电子信息
体育教育
小学教育
印刷工程
土木工程
书法论文
护理论文
心理学论
信息管理
公共事业
给水排水
范文首页
|
毕业论文
|
论文范文
|
计算机论文
|
外文翻译
|
工作总结
|
工作计划
|
现成论文
|
论文下载
|
教学设计
|
免费论文
|
原创论文
|
全站搜索
搜索
高级搜索
当前位置:
论文同学网:毕业论文范文网-论文范文
->
免费论文
->
医药医学论文
缺血性脑卒中的分子遗传学研究(三)
作者: 浏览:
15
次
免费专业论文
政治工作论文
计算机论文
营销专业论文
工程管理论文范文
医药医学论文范文
法律论文范文
生物专业论文
物理教学论文范文
人力资源论文范文
化学教学论文范文
电子专业论文范文
历史专业论文
电气工程论文
社会学专业论文
英语专业论文
行政管理论文范文
语文专业论文
电子商务论文范文
焊工钳工技师论文
社科文学论文
教育论文范文
数学论文范文
物流论文范文
建筑专业论文
食品专业论文
财务管理论文范文
工商管理论文范文
会计专业论文范文
专业论文格式
化工材料专业论文
英语教学专业论文
电子通信论文范文
旅游管理论文范文
环境科学专业论文
经济论文
人力资源论文范文
营销专业论文范文
财务管理论文范文
物流论文范文
财务会计论文范文
数学教育论文范文
数学与应用数学论文
电子商务论文范文
法律专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文
计算机专业论文
教育管理论文范文
现代教育技术论文
小学教育论文范文
机械模具专业论文
报告,总结,申请书
心理学论文范文
学前教育论文范文
收费计算机专业论文
Delphi
ASP
VB
JSP
ASP.NET
VB.NET
java
VC
pb
VS
dreamweaver
c#.net
vf
VC++
计算机论文
毕业论文范文题目:
缺血性脑卒中的分子遗传学研究(三)
,论文范文关键词:
缺血性脑卒中的分子遗传学研究(三)
缺血性脑卒中的分子遗传学研究(三)毕业论文范文介绍开始:
缺血性脑卒中的分子遗传学研究
1.细胞坏死因素 大多数脑缺血造成的细胞坏 死与能量缺失或细胞ATP合成代谢水平的急速降低有关,即ATP合成减少或消耗过量。缺血性脑损伤是由血流停止导致的缺血核心区域葡萄糖、氧和生长因子丢失而引起的。脑缺血时,葡萄糖和氧丢失导致线粒体ATP合成代谢显著下降,继而造成各种蛋白质功能障碍,包括钠⁃钾⁃ATP酶和钙⁃镁⁃ATP酶功能丧失。有效的葡萄糖供应可能是阻止神经元损伤级联反应的机制之一,但皮质神经元 细胞膜葡萄糖转运蛋白(GLUT)1/4在无血清或低氧、低糖应激条件下过度内陷,将导致葡萄糖运输显著减少,这可能与缺血诱导的核心区域生长因子缺乏有关。缺血所诱导的活性氧的产生和随后的线粒体膜损伤,也是线粒体ATP合成减少的原因。因为ATP的减少影响了钠⁃钾⁃ATP酶的活性,故推测这一机制启动了细胞坏死途径。钠⁃钾⁃ATP酶活性降低造成的细胞内钠离子聚集,可渗透压平衡和质膜,因此,可通过恢复GLUT外突和增加细胞ATP合成代谢或抑制ATP的快速减少来阻止细胞坏死[3]。 2.细胞坏死的实验模型 为了寻找抑制细胞坏 死的方法,目前采用无血清和低细胞密度培养方法构建单纯神经元坏死离体模型。其皮质神经元取自大鼠胚胎17d的脑组织,以0.1×106/cm2细胞密度接种于多聚鸟氨酸覆盖的培养皿中,经无血清培养6h,扫描电子显微镜分析发现神经元表面有许多微孔,透射电子显微镜可观察到典型的细胞坏死的特征性表现:细胞膜破坏,胞质电子密度丢失和线粒体肿胀;培养至12h细胞膜大部分破坏,仅细胞核无变化。细胞坏死可以通过碘化丙啶(PI)染色阳性和活化弹性蛋白酶⁃3阴性信号进一步加以证实。局灶性脑缺血后,邻近缺血区神经元快速坏死,且最初缺血核心区的神经元死亡是不可逆的,因此,阻止邻近缺血核心区神经元发生二次坏死是至关重要的。造成神经元二次坏死的原因可能与一些轻度缺血或来源于多种死亡细胞毒性分子有关。由于确定造成二次坏死的特异性分子十分困难,故可采用轻度缺血⁃再灌注模型产生缺血诱导的晚期神经元轻度坏死。神经元经低糖、低氧平衡盐溶液培养2h,再以常规含血清培养基再灌注,继续进行低密度细胞培养,结果显示,60%以上的皮质神经元于血清再灌注后3h呈现典型坏死,而其他神经元可存活至少12h,然而,极少甚至不出现核碎裂或固缩性凋亡。 3.细胞坏死抑制因子胸腺素原 胸腺素原 (ProTα)可在缺血应激时发挥神经保护作用。药理学研究显示,重组胸腺素原活性是通过磷脂酶C(PLC)和蛋白激酶Cβ(PKCβ)活化介导的[4]。无血清培养状态时,皮质神经元ATP和脱氧⁃D⁃葡萄糖含量迅速降低,缺血⁃再灌注应激后二者摄取量也迅速降低,而胸腺素原可显著改善上述情况。细胞免疫组织化学研究表明,低氧、低糖应激反应可抑制GLUT1/4的膜转运, 但这一作用可被胸腺素原所逆转。药理学研究发现,胸腺素原可通过对百日咳毒 素敏感的抑制性G蛋白α亚基、磷脂酶C和蛋白激酶CβⅡ机制逆转GLUT1/4内陷。Ueda等的研究结果提示,加入抗胸腺素原免疫球蛋白(IgG)能够完全逆转来自高细胞密度和无血清培养的神经元条件培养基诱导的细胞从坏死到凋亡形式的转换。 二、缺血诱导的细胞凋亡 1.凋亡诱导因子是位于线粒体的黄素蛋白 (Fp),具有还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化酶活性,并通过核基因编码。从线粒体易位至核的凋亡诱导因子(AIF)不依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspases)活性即可诱导DNA裂解和细胞凋亡。中枢神经系统损伤如全脑缺血、局灶性脑缺血和新生儿缺氧缺血时,均可发生凋亡诱导因子易 位 。局灶性脑缺血的最初数小时,缺血半暗带 区凋亡诱导因子即可从线粒体易位至核,导致DNA损伤和凋亡、核固缩。由于线粒体释放的凋亡诱导因子早于细胞色素C,故认为凋亡诱导因子所介导的细胞凋亡不依赖于Caspases活性。用于鞘内注射的苄氧羰基缬⁃丙⁃天冬氨酸⁃(O⁃甲基)⁃氟甲基酮为Caspases抑制剂,可阻止Caspases介导的胞衬蛋白(fodrin)降解,但不能明显抑制缺氧缺血脑损伤情况下凋亡诱导因子从线粒体释放。对离体细胞死亡模型的研究亦发现,无论是采用药物抑制Caspases活性还是敲除凋亡蛋白激酶激活因子⁃1(Apaf⁃1)或caspase⁃9基因,对线粒体⁃核易位凋亡诱导因子均无影响。而以单纯疱疹病毒作为载体将bcl⁃2基因转染至梗死灶周围组织,不仅可阻止凋亡诱导因子易位,还能够增加局灶性缺血后皮质神经元存活。提示:凋亡诱导因子可在不依赖Caspases的情况下从线粒体释放, 参与脑缺血后的细胞死亡信号途径。实验性脑缺血模型研究业已 证实,经RNA干扰培养的神经元或harlequin基因突变小鼠,其凋亡诱导因子蛋白表达水平下降,神经元死亡明显减少。因此,不依赖Caspases激发的细胞死亡信号有可能成为脑缺血治疗的新靶点。然而,脑缺血后凋亡诱导因子介导的神经元死亡的确切机制至今尚未阐明,可能与药物抑制或基因敲除阻止凋亡诱导因子易位至核的基因多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶⁃1(PARP⁃1)有关,活化型PARP⁃1是凋亡诱导因子介导不依赖于Caspases凋亡途径的关键步骤,表明PARP⁃1/AIF途径在介导缺氧缺血后的细胞凋亡方面发挥重要作用[5]。
(三)脑缺血脑损伤与氧化应激
诸多因素在缺血⁃再灌注损伤过程中起作用,而其中最为重要的因素即产生大量活性氧自由基 (ROS)。氧化应激是体内氧化和抗氧化作用 失衡导致的细胞还原电位大幅度下降的过程,脑缺血和缺血⁃再灌注过程中由于产生大量的氧自由基而诱发氧化应激。在氧化应激过程中,产生氧自由基的速率超过了细胞自身酶的解毒能力。
一氧化氮合酶 在人体,一氧化氮合酶 (NOS)利用精氨酸、氧气和NADPH产生一氧化氮,并在缺血⁃再灌注损伤过程中起重要作用。一氧化氮可以直接或通过衍生物间接抑制线粒体电子传递链,引起细胞能量危机和DNA损伤,导致DNA合成障碍和神经元死亡,同时增强缺血后兴奋性氨基酸——谷氨酸的释放,加重缺血后脑损伤。脑组织共存在3种一氧化氮合酶,分别是位于神经元中的神经元型一氧化氮合酶(nNOS);位于小胶质细胞、星形胶质细胞等可于特定条件下诱导产生的诱导型一氧化氮合酶(iNOS);以及位于脑血管内皮细胞中的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)。nNOS和 iNOS导致中枢神经系统损伤, 而eNOS则增加缺血半暗带区血流量,促进血管新生。eNOS的神经保护作用可能源自一氧化氮的血管扩张作用。含有nNOS的神经元,其自身即具有抵抗缺血损伤的能力,但从这些神经元释放的一氧化氮可杀死不含nNOS的神经元。nNOS敲除小鼠永久性局灶性脑缺血后,其梗死灶范围较正常小鼠缩小40%,短 暂性脑缺血发作后则缩小更明显。nNOS同时 还参与激活缺血皮质基质金属蛋白酶⁃9(MMP⁃9),导致炎性反应[6]。缺血早期一氧化氮水平的升高与缺血⁃再灌注时细胞外兴奋性氨基酸水平升高、钙离子内流激活结构型一氧化氮合酶(nNOS和eNOS)密切相关,而缺血后期一氧化氮水平的升高则由iNOS所致。对缺血⁃再灌注损伤脑组织进行检测显示,缺血⁃再灌注1h肿瘤坏死因子⁃α表达水平即升 高,24h后再次升高,该因子可通过核因子⁃κB(NF⁃κB)诱导iNOS表达,核因子⁃κB在正常情况下与其抑制蛋白(IκB)结合,而肿瘤坏死因子⁃α可导致核因子⁃κB抑制蛋白磷酸化,释放核因子⁃κB、启动iNOS等相关基因。体外细胞培养证实,在缺血、缺糖条件下,诱导iNOS合成一氧化氮并通过诱导神经元凋亡杀死内皮细胞,一氧化氮进而提高缺血脑组织中环氧合酶⁃2(COX⁃2)活性,环氧合酶⁃2阳性神经元与iNOS阳性中性粒细胞的位置相邻近;短暂性缺血可使N⁃甲基⁃D⁃天冬氨酸(NMDA)和磷脂酶A2(PLA2 )激活,海马、缺血半暗带区神经元和内皮细胞环氧合酶⁃2水平呈短暂性升高。一氧化氮通过抑制白细胞和血小板功能而提高缺血⁃再灌注损伤组织的血液供应,发挥神经保护作用。对eNOS⁃/⁃小鼠进行观察发现,eNOS不仅是血管内皮生长因子诱导血管扩张的下游调节酶,而且还可调控脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,影响神经细胞迁徙和神经突触的生长[8]。过氧亚硝基还可导致DNA双链中的一条断裂, 激活PARP⁃1,耗竭还原型辅酶Ⅱ,继而诱发神经元坏死。PARP⁃1刺激线粒体释放凋亡诱导因子,诱导与Caspases无关的神经元凋亡程序。PARP⁃1可介导多种转录因子,包括核因子⁃κB、活化蛋白⁃1(AP⁃1)和p53等,p53为诱导线粒体凋亡的关键蛋白质,缺血过程中产生的氧自由基可激活p53,并进一步激活其下游的促凋亡蛋白Bax、Noxa、p53AIP1、PUMA和Bid,这些蛋白质直接作用于线粒体,释放细胞色素C,最终导致神经元死亡。因此,PARP⁃1过度激活被认为是短暂性局灶性缺血损伤的重要原因之一。
缺血后抗氧化酶 有证据显示,施用抗氧化酶可有效防止氧化应激反应。例如,抗氧化剂可通过清除活性氧保护海马CA1区神经元免受缺血⁃再灌注损伤,提示抗氧化剂可以通过血⁃脑屏障到达脑组织起到神经保护作用。从植物中萃取的天然抗氧化剂EGB761(银杏叶提取物)和茶多酚,对缺血⁃再灌注损伤具有显著保护效果。抗氧化酶分为超氧化物歧化酶、硫氧还蛋白(Trx)、MAPK、 过氧化氢酶等[9]。
(四)脑缺血脑损伤与炎性反应
缺血性脑损伤时诱发的各种炎性因子1.细胞因子 为一组小分子糖蛋白,起细胞间 信使作用,可提高细胞黏附分子表达水平。在脑组织中,不同类型神经元能够表达不同类型的细胞因子,如缺血性脑损伤时,小胶质细胞、星形胶质细胞、血管内皮细胞和神经元均能表达不同的细胞因子参与炎性反应,并包括外周细胞分泌的细胞因子如吞噬细胞、T淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞等。目前,对细胞因子IL⁃1和6、肿瘤坏死因子⁃α和转化生长因子⁃β(TGF⁃β)研究较多且作用机制相对明确。(1)IL⁃1:有两种不同异形体,即IL⁃1α和IL⁃1β,IL⁃1通过两种不同的受体起作用。IL⁃1可诱导内皮细胞黏附分子表达,并促进中性粒细胞浸润;大脑中动脉闭塞小鼠腹腔注射重组IL⁃1β后,脑水肿和梗死范围增加、白细胞浸润及脑缺血加重。而IL⁃1受体阻断剂基因高表达小鼠和IL⁃1转化酶基因敲除小鼠,缺血性脑损伤程度明显缓解。尽管目前对IL⁃1功能的认识已有较大提高,然而,对于调节IL⁃1活性的细胞内机制仍存在分歧,尚需进一步研究。近期的离体实验结果显示,IL⁃1可激活神经胶质细胞和内皮细胞丝裂原活化蛋白激酶,包括细胞外信号调节激酶、JNK和p38信号转导通路;抑制细胞外信号调节激酶或p38活性即可降低IL⁃1表达。(2)IL⁃6:为另一种在缺血后呈高表达的细胞因子,其血浆水平升高预示神经系统受损,而且,由缺血诱导的IL⁃6表达水平升高可导致梗死灶范围扩大。但亦有文献报道,IL⁃6具有缓解缺血性脑损伤之功效。IL⁃6表达水平升高与缺血部位及缺血时程有关,其真正意义尚需进一步研究。(3)肿瘤坏死因子⁃α:为多功能细胞因子。有研究显示,大鼠脑缺血后TNF⁃αmRNA表达水平与IL⁃1和IL⁃6mRNA同步升高。脑缺血发生后,肿瘤坏死因子⁃α与其特异性受体TNFRⅠ(p55)和TNFRⅡ(p65)结合激活一系列蛋白质,包括蛋白激酶C、酪氨酸激酶、 MAPK、 磷脂酶A2及卵磷脂⁃特异性磷脂酶C。与其他细胞因子相同,肿瘤坏死因子⁃α信号转导通路中的第二阶段即核内转导,需激活数个转录因子,其中,转录因子核因子⁃κB与活化蛋白1从胞质转移至胞核,于核内激活细胞黏附分子及其他细胞因子的基因启动子]。虽然,体内外研究均显示肿瘤坏死因子⁃α与MAPK信号转导通路存在密切联系,但其第二信使转导系统在缺血性脑损伤过程中的作用机制尚不明确[10]。(4)转化生长因子:为多功能细胞因子,参与调控组织修复、疾病恢复等重要过程。啮齿类动物脑缺血1~6h脑组织即可检测到呈高表达的转化生长因子⁃β,并可持续15d。业已证实,于大鼠脑缺血半暗带区注射转化生长因子⁃β可缩小梗死灶范围,但在脑的其他部位则不显示这一保护作用[11]。
(五)脑缺血时神经血管单元和血⁃脑屏障改变
首页
上一页
1
2
3
4
5
6
下一页
尾页
3
/6/6
以上为本篇毕业论文范文
缺血性脑卒中的分子遗传学研究(三)
的介绍部分。
本论文在
医药医学论文
栏目,由
论文网
(www.zjwd.net)整理,更多论文,请点
论文范文
查找
相关论文
收费专业论文
汉语言文学论文
物理学论文
自动化专业论文
测控技术专业论文
历史学专业论文
机械模具专业论文
金融专业论文
电子通信专业论文
材料科学专业论文
英语专业论文
会计专业论文
行政管理专业论文
财务管理专业论文
电子商务国贸专业
法律专业论文
教育技术学专业论文
物流专业论文
人力资源专业论文
生物工程专业论文
市场营销专业论文
土木工程专业论文
化学工程专业论文
文化产业管理论文
工商管理专业论文
护理专业论文
数学教育专业论文
数学与应用数学专业
心理学专业论文
信息管理专业论文
工程管理专业论文
工业工程专业论文
制药工程专业论文
电子机电信息论文
现代教育技术专业
新闻专业论文
艺术设计专业论文
采矿专业论文
环境工程专业论文
西班牙语专业论文
热能与动力设计论文
工程力学专业论文
酒店管理专业论文
安全管理专业论文
交通工程专业论文
体育教育专业论文
教育管理专业论文
日语专业论文
德语专业论文
理工科专业论文
轻化工程专业论文
社会工作专业论文
乡镇企业管理
给水排水专业
服装设计专业论文
电视制片管理专业
旅游管理专业论文
物业管理专业论文
信息管理专业论文
包装工程专业论文
印刷工程专业论文
动画专业论文
环境艺术专业论文
信息计算科学专业
物流专业论文范文
人力资源论文范文
营销专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文范文
法律专业论文范文
教育管理论文范文
小学教育论文范文
学前教育论文范文
财务会计论文范文
电子商务论文范文
上一篇
:
生物技术药物口服微粒给药系统
下一篇
:
缺血性脑卒中的分子机制研究
最新论文
精品推荐
热门论文